593-84-0 / 硫氰酸胍的應用舉例

背景及概述^[1]

硫氰酸胍，化學名：硫氰酸亞氨脲，英文名：Guanidinethiocyanatesalt，其分子式為：(NH₂)₂C：NH·HSCN(118.2)。是白色結晶體，熔點116～121℃，20℃時，6mol/L在水中的PH值為4.5～6，溶解度為完全溶解。可作為生化試劑，醫(yī)藥中間體。用于油脂工業(yè)脫脂，日用化工中作為強脂降解劑，生物制藥上的細胞膜破裂劑。

應用^[1-3]

應用一、

解放軍總醫(yī)院生化科侯曉峰對硫氰酸胍抑制法檢測乳酸脫氫酶同工酶1(LDH1)進行方法學評價及性能驗證。方法：對硫氰酸胍抑制法檢測LDH1的不精密度、線性分析、回收實驗以及正常參考范圍等方面進行評價。結果：高、中、低值樣本批內不精密度分別為4.25%、1.57%和0.97%,批間不精密度分別為4.57%、2.55%和1.20%;線性分析的稀釋健全性良好,R2=0.998;平均回收率為101.56%;LDH1水平在性別間差異無統(tǒng)計學意義;正常參考范圍為33.11±5.76U/L。結論：硫氰酸胍抑制法檢測LDH1方法可靠、性能良好,符合實驗室要求,可在臨床廣泛開展使用。

應用二、

CN201110146840.5公開了不含基因組DNA的總RNA制備方法，采用十二烷基硫酸鈉作為裂解試劑，裂解細胞后使用醋酸鉀和十二烷基硫酸鈉反應生成十二烷基硫酸鉀(PDS)沉淀，同時共沉淀蛋白質以及大部分基因組DNA。然后利用在硫氰酸胍存在時核酸可被酚抽提液吸附，并且吸附的核酸可按分子量大小利用一定濃度醋酸鉀解離的性質，在核酸中加入一定濃度的硫氰酸胍和酸性醋酸鉀，采用酚抽提分離總RNA和殘留的基因組DNA。最后采用乙醇沉淀得到總RNA樣品。本法利與現(xiàn)有技術相比，所得RNA樣品殘留基因組DNA最少，每微克103拷貝(約4皮克)。

應用三、

CN201711222569.2提供一種人糞便中脫落細胞核酸提取裂解液，包括：1mol/L～8mol/L胍鹽、1mM～20mM金屬離子螯合劑和pH7.5～8.0的100mM-Tris-HCl緩沖溶液，其中，胍鹽選自鹽酸胍、異硫氰酸胍和硫氰酸胍中的至少一種，金屬離子螯合劑選自乙二胺四乙酸和乙二胺四乙酸的水溶性鹽中的至少一種。優(yōu)選地，還包括1％體積～20％體積的表面活性劑，表面活性劑為非離子型去污劑，非離子型去污劑選自Tween-20、Tween-80、Brij-35、NP40和Triton-100中的至少一種。還提供了相關制備方法和應用。本發(fā)明的裂解液能夠快速高效裂解細胞，充分釋放核酸，滿足后續(xù)核酸檢測用量，適于大規(guī)模推廣應用。

參考文獻

[1]CN201711222569.2人糞便中脫落細胞核酸提取裂解液及其制備方法和應用

[2]侯曉峰,李娟,郭廣宏.硫氰酸胍抑制法測定乳酸脫氫酶同工酶1的方法學評價[J].標記免疫分析與臨床,2015,22(08):798-799+810.

[3]CN201110146840.5不含基因組DNA的總RNA制備方法