鹽酸沃尼妙林（Valnemulin Hydrochloride，VA）是以截短側(cè)耳素為母核的基礎(chǔ)上研發(fā)出的動(dòng)物用抗生素，，屬二萜烯類，與泰妙菌素屬同一類藥物。國(guó)外主要用于預(yù)防與治療豬、牛、羊及家禽的支原體病和革蘭氏陽性菌感染，具有抗菌譜廣、抗菌的活性相對(duì)較強(qiáng)、殘留低、安全等特點(diǎn)。1999 年由歐共體批準(zhǔn)用于預(yù)防與治療由豬痢疾短螺旋體 (Brachyspira Hyodysenteriae)感染引起的豬痢疾和由肺炎支原體感染引起的豬地方性肺炎。2004 年1月被歐共體批準(zhǔn)預(yù)防由結(jié)腸菌毛樣短螺旋體(Brachyspira pilosicoli)感染引起的豬結(jié)腸螺旋體病 ( 結(jié)腸炎 colitis) 和治療由細(xì)胞內(nèi)勞森菌感染引起的豬增生性腸病（回腸炎ileitis）。現(xiàn)國(guó)內(nèi)未有合法的該原料或其制劑上市銷售 , 正在申報(bào)二類新獸藥注冊(cè)。

理化性質(zhì)【1】

其性狀為白色或微黃色的無定形粉末，易吸濕；易溶于極性溶劑中，在非極性溶劑中溶解度低，尤其是不溶于甲基叔丁基醚。熔點(diǎn)為 174～177℃，比旋度為+15.5°～+18.0°。

藥理作用【2】

沃尼妙林是一種非常有效的新型動(dòng)物專用抗生素，以其優(yōu)良的抗菌活性和特殊的藥動(dòng)學(xué)特征，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于蓄禽的革蘭氏陽性菌、支原體、螺旋體等感染性疾病的治療，獸藥臨床上可用于豬、牛、羊、肉雞等畜禽細(xì)菌性感染的治療。VA一般口服應(yīng)用于治療豬的呼吸道疾病和細(xì)菌性腸道疾病。因?yàn)槲帜崦盍志哂懈咚降募?xì)胞內(nèi)活性，所以對(duì)治療細(xì)胞內(nèi)勞森菌感染的效果較佳。它對(duì)細(xì)胞內(nèi)勞森菌的MIC小于2μg/mL，75ppm就可以完全治愈疾病，消除病變和感染了，并且可以阻止向體外排菌；它對(duì)豬的螺旋體結(jié)腸炎也非常有效，其原因是可減少結(jié)腸菌毛樣短螺旋體在腸道定植與向體外排菌，減輕臨床癥狀，以達(dá)到治療的目的；它對(duì)豬肺炎支原體病特別有效，可以使肺損傷及重量損失減少，但是不能清除體內(nèi)已感染的肺炎支原體，并且豬肺炎支原體對(duì)沃尼妙林不易產(chǎn)生抗藥性。它對(duì)豬的肺炎支原體的MIC為0.0625-0.125mcg/mL。

抗菌活性【1】

鹽酸沃尼妙林是一種具有光譜抗菌活性的截短側(cè)耳素類抗生素，其廣泛的抗菌活性可作用于革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌、厭氧菌、支原菌和螺旋體菌。又因?yàn)槠浣Y(jié)構(gòu)的特點(diǎn)，不易出現(xiàn)現(xiàn)在市面上大部分抗菌素對(duì)細(xì)菌耐藥性的問題。目前獸用抗生素很難控制的結(jié)腸菌毛樣短螺旋體，鹽酸沃尼妙林也表現(xiàn)了出色的治療效果。不僅如此，在對(duì)抗幽門螺桿菌等細(xì)菌上，鹽酸沃尼妙林也具有了更加出眾的表現(xiàn)。

藥代動(dòng)力學(xué)【1】

歐洲的EMEA經(jīng)過研究表明，鹽酸沃尼妙林作用于動(dòng)物體內(nèi)時(shí)，能夠同時(shí)對(duì)機(jī)體多部位產(chǎn)生效果，利用率高，并且在體內(nèi)的停留時(shí)間短。在一組使用放射性元素標(biāo)注的實(shí)驗(yàn)中，不久后將白鼠殺死，取不同組織的樣品進(jìn)行檢測(cè)，得到的結(jié)果是在肺臟、肝臟等地發(fā)現(xiàn)了大量的放射性元素，并經(jīng)高效液相色譜分析后，用藥后的白鼠肝臟等組織中有20多種代謝產(chǎn)物。同樣，使用犬類進(jìn)行藥物代謝實(shí)驗(yàn)，也在肝臟組織中發(fā)現(xiàn)了大量的放射性元素。
鹽酸沃尼妙林的吸收與代謝也是非常迅速的。使用含有放射性元素的鹽酸沃尼妙林喂養(yǎng)15頭豬，喂養(yǎng)量為5mg/kg體重，連續(xù)喂養(yǎng)七天半后停止喂藥。停藥兩天后分別取各部分組織進(jìn)行化驗(yàn)，肝臟中含有的沃尼妙林含量最高，占總藥量的92%以上，其組織中含有沃尼妙林的濃度高達(dá)3650μg/kg，剩下少量的藥物分別存在于腎臟與肌肉中。在皮膚中沒有發(fā)現(xiàn)藥物存在。但是，停止用藥八天后，各組中的含有的藥物濃度還不到上回測(cè)得濃度的九分之一。通過對(duì)豬排泄物的檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)其主要的排出方式是通過糞便排泄出去。

作用機(jī)制【2】

截短側(cè)耳素類是種由真菌即一種食用菌產(chǎn)生的抗菌劑，其絕大部分衍生物還沒被開發(fā)。沃尼妙林的抗菌機(jī)理與泰妙菌素相似，都是抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)在核糖體水平上的合成，沃尼妙林與病原體微生物核糖體上的50s亞基結(jié)合，蛋白質(zhì)被抑制從而不能合成，阻止了肽基轉(zhuǎn)移酶正確定位，病原體微生物蛋白質(zhì)的合成被抑制，最終導(dǎo)致病原微生物死亡。高低濃度的沃尼妙林都能抑制RNA的合成。高濃度時(shí)主要是起抑菌作用，但是也可以殺菌。抗菌譜廣，有效的抗菌種有：革蘭氏陽性菌及陰性菌，霉形體和螺旋體菌、葡萄球菌、鏈球菌、白色念珠菌、豬肺炎支原體、豬痢疾短螺旋體、結(jié)腸菌短螺旋體、細(xì)胞內(nèi)勞森菌等等。

毒性【1】【2】

鹽酸沃尼妙林因?yàn)槠涠拘缘停⑶也粫?huì)出現(xiàn)傳統(tǒng)意義上的“三致現(xiàn)象”，所以受到了各國(guó)養(yǎng)殖戶的青睞。其用于大鼠毒性實(shí)驗(yàn)時(shí)，其 LD50 僅為 1000-2000 mg/kg 體重；使用豬來進(jìn)行毒性實(shí)驗(yàn)時(shí)，也得到了良好的治療效果，并且沒有毒性現(xiàn)象的出現(xiàn)。在藥品的設(shè)計(jì)公司進(jìn)行的毒性實(shí)驗(yàn)中，動(dòng)物排出的糞便中含有的有效成分含量大大低于要求，其對(duì)環(huán)境的影響可以忽略不計(jì)。
沃尼妙林的毒性很低、副作用少、代謝快，所以對(duì)動(dòng)物器宮的損傷低，并且不易導(dǎo)致體內(nèi)藥物蓄積殘留，而且用的劑量小，按其活性物質(zhì)計(jì)算，大鼠的口服半數(shù)致死量在1000-2000mg/Kg體重，雄、雌小鼠的口服半數(shù)致死量分別為1710mg/Kg體重、1482mg/Kg體重沃尼妙林均沒致畸性、致癌性、致突變性，同時(shí)對(duì)VA免疫系統(tǒng)、繁殖系統(tǒng)均無任何影響。

制備方法【4】【5】

1.截短側(cè)耳素經(jīng)苯磺酰化后經(jīng)1-氨基-2-甲基丙-2-硫醇鹽酸鹽取代，得到[(2-氨基-1,1-二甲基乙基)硫基]乙酸(3aS,4R,5S,6S,8R,9R,9aR,10R)-6-乙烯基十氫-5-羥基-4,6,9,10-四甲基-1-氧代-3a,9-丙醇-3aH-環(huán)戊二烯并環(huán)辛烯-8-基酯(5)。另用D-纈氨酸和乙酰乙酸甲酯反應(yīng)后，與氯甲酸異丁酯成酸酐，與5成酰胺后用鹽酸脫保護(hù)，制得抗生素鹽酸沃尼妙林，總收率約為64％(以截短側(cè)耳素計(jì))。

（1）2-(4-甲基苯磺酰氧基)乙酸(3aS,4R,5S,6S,8R,9R,9aR,10R)-6-乙烯基十氫-5-羥基-4,6,9,10-四甲基-1-氧代-3a,9-丙醇-3aH-環(huán)戊二烯并環(huán)辛烯-8-基酯(3)
2溶于MTBE(200ml)。加入水(40ml)，冰水浴冷卻至0～3℃攪拌15min。滴加對(duì)甲苯磺酰氯(42.0g，0.22mol)、MTBE(160ml)和水(120ml)的混合物。滴畢于室溫?cái)嚢?0min。冰鹽浴冷卻至0℃，緩慢滴入1mol/L氫氧化鈉水溶液(50ml)，加熱回流0.5h后冷卻至室溫。冰鹽浴冷卻到0℃，加入水(40ml)，過濾，濾餅依次用水(20ml×3)和冷乙醚(20ml×3)洗滌，干燥后得白色固體3。

（2）[(2-氨基-1,1-二甲基乙基)硫基]乙酸(3aS,4R,5S,6S,8R,9R,9aR,10R)-6-乙烯基十氫-5-羥基-4,6,9,10-四甲基-1-氧代-3a,9-丙醇-3aH-環(huán)戊二烯并環(huán)辛烯-8-基酯(5)4(9.4g，0.07mol)溶于水(10ml)中，加入10mol/L氫氧化鈉水溶液(13.9ml)，攪拌至全溶。加入MTBE(160ml)，室溫?cái)嚢?5min，分批加入3(32.0g，0.06mol)，再加入氯化三正丁基芐銨(1.31g，0.004mol)。室溫?cái)嚢?h后，冰鹽浴冷卻至0℃，析出大量白色固體。過濾，濾餅用水(15ml×3)洗滌，干燥后得白色固體5。

（3）(R)-2-[1-(甲氧羰基)-2-烯丙基]氨基-3-甲基丁酸鉀(6)氫氧化鉀(14.0g，0.25mol)溶于異丙醇(480ml)中，室溫?cái)嚢柘路峙尤隓-纈氨酸(23.2g，0.29mol)。攪拌10min后，滴入乙酰乙酸甲酯(25.6g，0.22mol)。滴畢加熱到65℃，全溶后加熱回流1h。冷卻至室溫，減壓蒸去溶劑，剩余物中加入異丙醇(50ml)。減壓蒸干后再加入異丙醇(50ml)，加熱回流15min。反應(yīng)液倒入MTBE(500ml)中，0℃攪拌2h。抽濾，濾餅用水(20ml×3)洗滌，干燥后得白色固體6(41.0g)。濾液和洗液合并后靜置，抽濾，濾餅用水洗滌后干燥，又得白色固體6(2.0g)。

（4）鹽酸沃尼妙林(1)
6(7.5g，0.03mol)加至乙醚(200ml)中，加入NMM(0.28g，0.003mol)。緩慢加入氯甲酸異丁酯(4.2g，0.03mol)。于20℃攪拌1h，加入5(13.0g，0.028mol)，同溫繼續(xù)攪拌2h。加水(20ml)淬滅反應(yīng)。反應(yīng)混合物倒入2mol/L鹽酸(100ml)中，攪拌1h。加入水(50ml)，分液。水相用乙醚(50ml×2)洗滌，減壓蒸除溶劑，得白色固體1(12.7g，76％)。

圖1為鹽酸沃尼妙林的合成路線1

2.以截短側(cè)耳素為起始原料,首先與二甲基半胱胺鹽酸鹽進(jìn)行相轉(zhuǎn)移催化反應(yīng),然后與氨基保護(hù)的纈氨酸進(jìn)行酰胺化反應(yīng),最后脫掉保護(hù)基,用鹽酸處理,即得到鹽酸沃尼妙林,收率54.9%。

（1）化合物3的合成

在250mL三口燒瓶中加入異丙醇(135mL)、氫氧化鈉(3.3g,0.0825mol)、纈氨酸(8.0g,0.0684mol)、乙酰乙酸甲酯(9mL),水浴加熱至33～35℃,分餾出異丙醇(100mL),加入丙酮80mL,攪拌結(jié)晶1h,抽濾,適量丙酮洗滌,干燥,得白色結(jié)晶性粉末3(7.4g,收率50.5%)。

（2）化合物1的合成

在150mL燒瓶中加入二甲苯(50mL),N,N-二甲基乙酰胺(7mL),化合物3(1.6g,0.0074mol),化合物2(2.4g,0.0049mol),加熱到40～43℃攪拌反應(yīng)2h。加鹽酸,調(diào)pH=2.5～3.0,室溫反應(yīng)1h。用30mL二氯甲烷進(jìn)行萃取,分液后重新用15mL二氯甲烷洗滌,水相旋轉(zhuǎn)蒸干,45℃以下干燥,得白色結(jié)晶狀產(chǎn)品1(2.0g,收率69.3%)。

圖2為鹽酸沃尼妙林的合成路線2

臨床應(yīng)用【2】

VA在南北美洲、歐洲、英美、東南亞及和澳大利亞等許多個(gè)國(guó)家上市，市場(chǎng)反應(yīng)良好，療效也得到市場(chǎng)的認(rèn)可。到目前為止，我國(guó)獸藥市場(chǎng)上大多用的是VA，因沃尼妙林的溶解性差導(dǎo)致其開發(fā)、使用受限，遠(yuǎn)征公司研究開發(fā)的VA原料藥和其預(yù)混劑，被農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)為國(guó)家二級(jí)類新獸藥。

適應(yīng)癥【3】

主要用于防治雞的慢性呼吸道病，豬地方性肺炎(或稱豬氣喘病、豬支原體肺炎)、放線菌性胸膜肺炎、豬痢疾、豬結(jié)腸螺旋體病 (結(jié)腸炎)、豬增生性腸病（回腸炎）。

藥物互相作用【3】

1.本品可影響莫能菌素、鹽霉素等離子載體類抗生素的代謝, 聯(lián)合應(yīng)用時(shí)可出現(xiàn)生長(zhǎng)緩慢、運(yùn)動(dòng)失調(diào)、麻痹癱瘓等不良反應(yīng)。

2.與能結(jié)合細(xì)菌核糖體50S亞基的抗生素合用, 有拮抗作用。

3.與金霉素以7.5∶40或與多西環(huán)素以 7.5∶25 配伍混飼, 對(duì)豬呼吸道病原體感染呈協(xié)同作用。

不良反應(yīng)【3】

1.豬的不良反應(yīng)主要發(fā)生在丹麥和瑞典的長(zhǎng)白豬，表現(xiàn)為發(fā)熱、無食欲、共濟(jì)失調(diào)、躺臥，水腫或紅斑，眼瞼水腫，死亡率小于1%，但若有繼發(fā)感染，死亡率可提高。

2.飼料濃度大于200ppm， 會(huì)出現(xiàn)采食下降，或在頭幾天不愿采食。

3.與莫能菌素、鹽霉素等離子載體類抗生素配伍使用, 可增加后者的毒性。

主要參考資料

[1]付江濤. 鹽酸沃尼妙林合成及純化工藝研究[D].河北科技大學(xué),2013.

[2]何江梅. 鹽酸沃尼妙林制劑的制備及抗菌效果研究[D].西南大學(xué),2014.

[3]吳廣輝,方炳虎,劉小艷,陳良柱.新獸藥鹽酸沃尼妙林研究進(jìn)展及使用[J].獸醫(yī)導(dǎo)刊,2007(11):29-30.

[4]馮德鑫,李新樂,潘強(qiáng),王崢,Michael H.CHEN.鹽酸沃尼妙林的合成[J].中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志,2010,41(04):244-246.