3184-13-2 / L-鳥氨酸鹽酸鹽的制備方法

概述^[1]

L-鳥氨酸鹽酸鹽是重要的醫藥工業基礎原料，是細胞中重要的代謝產物，對于生物體內液態氨的排除有重要的調節作用。

生產方法^[1]

目前，國內外對于酶法轉化生產L-鳥氨酸鹽酸鹽的文獻報道不一。L-鳥氨酸鹽酸鹽的制備方法主要有三種：化學法、發酵法和酶法。

1化學法

目前工業上最常用的生產方法是采用化學法水解L-精氨酸制備L-鳥氨酸，1966年Shell Int.Rearsch采用丙烯酸和氰化鈉作為主要原料化學合成L-鳥氨酸。

2發酵法

用腸桿菌中的某些菌如Escherichia coli，Aerobacter aerogenes，Proteus rettgeri和Proteus mirabili的突變菌株，進行發酵生產L-鳥氨酸，發酵液中L-鳥氨酸最高為15mg/mL，Shibuya等利用Arthrobacter citreus 23-2A的突變株發酵生產L-鳥氨酸，發酵72h，產率為35.2g/L。

3酶法

沈淑英等用糞鏈球菌ATCC8043，糞產堿桿菌ATCC21400，糞鏈球菌S-43游離細胞轉化底物L-精氨酸制備L-鳥氨酸，轉化率為95-100％，提取收率為85-90％(天津微生物，1981，3：28-38)。1995年，M Kyriakos等利用從動物肝臟中提取的精氨酸酶水解L-精氨酸用于多種L-鳥氨酸鹽的制備。

上述L-鳥氨酸酶法生產過程都是利用游離細胞轉化底物L-精氨酸，所以轉化液中會含有少量菌體蛋白和其他雜質，不利于產物的分離純化；且轉化后要去除菌體，降低產物得率，導致生產成本增加。

制備方法^[2]

一種酶轉化生產L-鳥氨酸鹽酸鹽的方法，其特征在于操作簡單、精氨酸轉化率高、產量高，該方法包括如下步驟：

(1)固定化酶的制備

取三乙醇胺陰離子苯乙烯樹脂，用碳酸鉀溶液浸泡6-18h后過濾，再將濾出的三乙醇胺陰離子苯乙烯樹脂與碳酸鉀、溴化氫按質量比為1∶(0.1-0.6)∶(0.2-0.5)配制成反應溶液，于冰浴中反應5-60min，調節pH值至7-10，再加入精氨酸酶，使其與三乙醇胺陰離子苯乙烯樹脂的質量比為(0.002-0.01)∶1，于1-10℃反應12-48h，洗滌后用飽和食鹽水浸泡0.5-3h，再洗凈即制得固定化酶，保存于水中；

(2)轉化條件的優化

將步驟(1)中制得的固定化酶與精氨酸、乙酸錳按質量比1∶(1-3)∶(0.004-0.02)混合，溶于去離子水中，調節pH值至6-9，在30-50℃下，攪拌反應得到混合液；

(3)產物提取和精制

將步驟(2)中的混合液過濾后，向濾液中加入活性炭，用鹽酸調節pH值至3-6，于40-90℃下攪拌反應5-30min后，過濾，將濾出液濃縮至有結晶析出，停止濃縮，加入醇類，攪拌0.5-3h，析出L-鳥氨酸鹽酸鹽，過濾、干燥即得產品。

參考資料

[1]蘇建勇, 鄭南華, 張建宇. 一種固定化酶法生產l-鳥氨酸鹽酸鹽的方法:.

[2]劉愛福. L-鳥氨酸鹽酸鹽的制備方法:.