9031-11-2 / β-半乳糖苷酶的應(yīng)用

β-半乳糖苷酶是一種重要的糖苷水解酶，在乳制品、食品和制藥行業(yè)具有潛在應(yīng)用。該酶由細(xì)菌和酵母在細(xì)胞內(nèi)環(huán)境中產(chǎn)生。

催化反應(yīng)

β-半乳糖苷酶的活性端通過“淺層”與“深層”結(jié)合基質(zhì)來催化水解雙糖。一價的鉀離子（K +），以及二價的鎂離子（鎂2 +）需要酶的最佳活性。以β-核苷間鍵為基質(zhì)經(jīng)由谷氨酸側(cè)鏈上的羧基終端裂解而成。 在大腸桿菌中，谷氨酸-461被認(rèn)為是取代反應(yīng)的親核試劑。然而，現(xiàn)在已經(jīng)知道谷氨酸-461是一種酸[催化劑]。相反的，谷氨酸-537為實(shí)際的親核試劑，他是結(jié)合到半乳糖的中間體。

在人類中，是由Glu-268扮演水解反應(yīng)的親合試劑。

β-半乳糖苷酶所催化的反應(yīng)

應(yīng)用

β-半乳糖苷酶檢測常用于遺傳學(xué)、分子生物學(xué)，以及其他生命科學(xué)。可用于藍(lán)/白篩檢測中，有活性的酶可以用X-gal來進(jìn)行檢測，會在裂解β-半乳糖苷后形成一個深藍(lán)色的產(chǎn)物5-溴-4-淀藍(lán)，并且容易辨識和量化。它的生產(chǎn)可以透過非水解性誘導(dǎo)結(jié)構(gòu)異構(gòu)物中的異乳糖─IPTG，從lac操作者中結(jié)合并釋放lac操縱子，從而使轉(zhuǎn)錄起始端繼續(xù)進(jìn)行。

因?yàn)樗母弑憩F(xiàn)性質(zhì)以及它在衰老細(xì)胞中的溶酶體累積的特性。盡管有其局限性，它可被當(dāng)作一個老化的標(biāo)志物，借由進(jìn)行體內(nèi)和體外在定性和定量可用以測定老化程度。