908-54-3 / 二乙酰胺三氮脒的制備方法

背景及概述^[1][4]

乙酰胺三氮脒屬于芳香雙脒類，是傳統使用的廣譜抗血液原蟲藥，如對家畜梨形蟲、錐蟲和無形體均有治療作用，但預防效果較差。

制備方法^[1]

具體生產方法為：以對硝基苯甲酸為原料，在高溫下與對甲苯磺酰胺發生氰化反應，生成對硝基苯腈(C7H4N202[619-72-7]。然后由對硝基苯腈加成、胺化、還原、重氮化、偶合、成鹽而得二乙酰胺三氮脒。(1)、加成、胺化，將對硝基苯腈、甲醇、甲醇鈉加入反應鍋，攪拌溶解，在25-30℃反應3h。加入氯化銨，在10-15℃攪拌反應5h。回收甲醇至干，加入稀鹽酸煮沸，過濾，得對硝基苯脒鹽酸鹽溶液；(2)、還原，將上述溶液加熱至50℃，加入冰醋酸，于60℃慢慢加入鐵粉。加畢，升溫至105℃反應5h。過濾，濾液用氫氧化鈉溶液堿化至pH為12。過濾，用鹽酸將濾液重新酸化至pH為1-2。濃縮，冷卻結晶，過濾，得對氨基苯脒鹽酸鹽；(3)、重氮化、偶合，先將一半量的對氨基苯脒鹽酸鹽加入水中，加鹽酸溶解，于-5-0℃滴加10％的亞硝酸鈉溶液，用碘化鉀淀粉試紙檢查終點，將另一半量的對氨基苯脒鹽酸鹽加少量水混勻后加入，再加飽和乙酸鈉，析出黃色沉淀。過濾，濾餅溶于水中，用10％氫氧化鈉溶液調節pH至9-10，析出結晶。甩濾。將濾餅加入反應釜中，加400kg純化水，攪拌，升溫，于50-65℃溶解，再降至0℃，用10％氫氧化鈉溶液調節pH9-10，甩濾，60℃烘干得即得1，3-雙(對脒基苯)-三氮烯；(4)、成鹽，將上述三氮烯、乙酰甘氨酸、甲醇攪拌0.5h后，用氨水調節至pH為7，升溫回渡溶解。加活性炭，過濾，濾液冷卻結晶。過濾、干燥，得二乙酰胺三氮脒。

藥理作用^[2]

對家畜的錐蟲、梨形蟲及邊蟲(無形體)均有作用。用藥后血中濃度高，但持續時間較短，故主要用于治療，預防效果差。其作用機理是選擇性地阻斷錐蟲動基體的DNA合成或復制，并與細胞核產生不可逆性結合，從而使錐蟲的動基體消失，并不能分裂繁殖。

臨床應用^[2]

對家畜的錐蟲、梨形蟲及邊蟲(無形體)均有作用。用藥后血中濃度高，但持續時間較短，故主要用于治療，預防效果差。其作用機理是選擇性地阻斷錐蟲動基體的DNA合成或復制，并與細胞核產生不可逆性結合，從而使錐蟲的動基體消失，并不能分裂繁殖。

殘留檢測^[3]

二乙酰胺三氮脒是目前比較常用的新型抗血液原蟲藥，主要使用對象為泌乳期的奶牛，不合理的使用會造成生鮮乳中獸藥殘留，存在一定的安全風險。

一種測定二乙酰胺三氮脒含量的方法，具體檢測步驟如下所示：

步驟一、于待測物中加入酸化乙腈溶液，均質，提取0.5-5分鐘后，離心2-20分鐘；酸化乙腈可以為甲酸乙腈、乙酸乙腈、丙酸乙腈等各類酸化乙腈溶液。優選提取0.5-1.5分鐘，離心3-6分鐘。在步驟一中，該均質、和/或提取、和/或離心的過程可以為一次或多次，優選為2-3次。

采用酸化的乙腈可以很好地沉淀乳制品的蛋白質，其分離效果極好。

步驟二、取上清液加載到固相萃取柱中，依次采用至少一次的堿液、至少一次的醇溶液、至少一次的酸化醇溶液洗脫，收集全部洗脫液；固相萃取柱可以選自弱陽離子交換柱，當采用弱陽離子交換柱時，需用酸性溶液洗脫待測物品。在本發明的具體操作過程中發現，選用酸性溶液洗脫待測物較其他溶劑洗脫效果好。該上清液的取用量為總量的50-90％。該堿液、醇溶液和酸化醇溶液的用量為上清液的0.5-5倍。該堿液、醇溶液和酸化醇溶液的體積比為1:0.8-1.5:0.8-1.5。

步驟三、洗脫液在30-60℃的溫度下，經由保護氣干燥濃縮(如：氮氣等保護氣吹干等方式)，用酸和乙腈的混合水溶液定容；酸和乙腈的混合水溶液用量，按檢測的需要進行配置，或按濃度比例進行配置。

步驟四、過濾后，采用液相色譜質譜聯用法對其進行定量分析；該過濾方式可以為膜過濾、以石英砂、硅膠、海藻砂、濾紙等為介質的過濾。

主要參考資料

[1][中國發明] CN201310539401.X 一種三氮脒的生產方法

[2]注射用三氮脒說明書

[3][中國發明,中國發明授權] CN201610976684.8 一種測定乳制品中三氮脒含量的方法