1257044-40-8 / 維特克拉的主要制備方法

背景及概述^[1]

維特克拉(venetoclax，ABT-199)是選擇性B細胞淋巴瘤因子-2(B-celllymphoma-2，BCL-2)抑制劑，是美國FDA批準的、用于治療慢性淋巴細胞白血病的突破性藥物，受到全球有關方面的廣泛重視。該藥物的作用靶點是BCL-2的亞型BCLxL，對BCL-2的其他亞型無明顯作用。該化合物的相對分子質量為868.44，水溶性較差，但膜通透性良好，屬生物藥劑學分類系統(biopharmaceuticalclassificationsystem，BCS)第二類藥物。維特克拉的原研制劑為維特克拉片劑，未在中國大陸進行銷售，在美國上市的維特克拉片也無體內體外相關性公開報道。如需進行仿制，首先要做到仿制藥與原研藥體內生物利用度的一致性(bioequivalency，BE)，而進行體內外相關性研究，找到與體內釋藥相關的體外溶出條件，可大幅度降低仿制藥的研發成本并提高成功率(通過BE)。且此藥物是針對BCL-2靶點的首個上市新藥，開展其體內體外相關性研究，也為該靶點的其他創新藥物研究提供參考，有利于提高BCL-2靶點的其他相關藥物制劑成功研發上市的概率。

應用^[2]

維特克拉化學名為4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基環己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氫-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺，是第一個靶向B細胞淋巴瘤因子2(BCL-2)的選擇性抑制藥。白血病患者細胞中的B細胞淋巴瘤因子2(B-celllymphoma-2，BCL-2)可促進癌細胞生長，在B淋巴細胞和其他B細胞惡性腫瘤中常過度表達，于2016年4月11日被FDA批準上市，用于慢性淋巴細胞白血病。

體內體外相關性^[1]

考察維特克拉(venetoclax)制劑的體外釋藥行為和在比格犬體內的藥動學過程，進行體內體外相關性(IVIVC)的研究。研究測定維特克拉制劑在不同溶出介質中的溶出曲線；建立維特克拉在比格犬血漿樣品中的HPLC測定方法，并對市售的維特克拉片進行飽腹和空腹下比格犬體內的藥動學研究；將藥物在體外累積溶出度數據與在體內的累積吸收百分數數據進行線性回歸，進行IVIVC研究。結果維特克拉制劑在4種不同溶出介質中體外的釋藥行為存在明顯差異；維特克拉制劑飽腹和空腹的AUC0→∞分別為(32.38±5.87)和(27.70±6.32)mg·h·L－1，達峰濃度分別為(4.04±0.78)和(3.72±0.69)μg·mL－1，達峰時間分別(6.01±1.04)和(4.27±0.92)h，其中AUC0→∞和達峰時間的差異具有顯著性(P＜0.05)；體內吸收百分數與在0.2%SDSpH6.8介質中的體外溶出度有良好的IVIVC。結論食物可提高維特克拉制劑的生物利用度；實驗篩選出的0.2%SDSpH6.8介質(槳法，75r·min－1)可以作為與該制劑體內釋藥相關的體外溶出條件。

制備^[2]

一種維特克拉的制備方法：

步驟1：4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基環己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-[(3-硝基-4-氟苯基)磺酰基)]-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺/4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基環己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-[(3-硝基-4-氯苯基)磺酰基)]-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺(Ⅲ)的制備

將化合物(Ⅱ)(20.0g，35.0mmol)溶于300mL二氯甲烷(DCM)中，室溫條件下依次加入3-硝基-4-氟苯磺酰胺(8.5g，38.5mmol)、4-二甲氨基吡啶(DMAP)(6.4g，52.5mmol)、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDC.HCL)(10.1g，52.5mmol)。控制溫度20～30℃攪拌反應16小時。反應完畢后加入5％乙酸水溶液100mL洗滌一次，然后再用100mL水洗滌一次，有機相用20g硫酸鈉干燥、過濾、旋干，得含氟化合物(Ⅲ)固體26.1g，收率96.3％，直接用于下一步投料。

步驟2：4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基環己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氫-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺(Ⅰ)的制備

將含氟化合物(Ⅲ)(25.0g，32.3mmol)溶于200mL四氫呋喃(THF)中，室溫條件下加入四氫吡喃-4-甲胺(5.6g，48.5mmol)和N,N-二異丙基乙胺(DIPEA)(6.27g，48.5mmol)。升溫至60～65℃攪拌反應5小時，TLC檢測顯示原料反應完畢。反應完畢后減壓濃縮，濃縮物加入500mL二氯甲烷攪和200mL純化水，攪拌后分離出水相，有機相用1％乙酸水溶液150mL洗滌一次，然后再用200mL水洗滌一次，有機相用20g硫酸鈉干燥、過濾、旋干，粗品用200mL四氫呋喃重結晶，過濾、干燥得維特克拉精制品(Ⅰ)淡黃色粉末25.1g，收率89.3％。經申請人質譜分析為式Ⅰ結構，經HPLC分析，純度為99.82％。

主要參考資料

[1]維特克拉體內體外相關性研究

[2]CN201811450340.9一種維特克拉的制備方法及其產品