134036-52-5/酪氨酸磷酸化抑制劑AG490的生物活性和藥理研究

背景及概述^[1]

酪氨酸磷酸化抑制劑AG490是個人工合成的苯亞甲基的丙二腈的脂類衍生物,類似于酪氨酸和癌基因抑活藥,可以和受體酪氨酸激酶競爭結合位置。除了可以阻斷Jak2,酪氨酸磷酸化抑制劑AG490還可可以有效地阻斷T細胞Jak3,從而阻斷Jak/STAT信號傳導,引起一系列免疫學效應。

生物活性^[2]

酪氨酸磷酸化抑制劑AG490是一種EGFR抑制劑，IC50為0.1μM，作用于EGFR比作用于ErbB2選擇性高135倍，對JAK2也有抑制作用，對Lck，Lyn，Btk，Syk和Src沒有抑制活性。酪氨酸磷酸化抑制劑AG490抑制EGF依賴的HER14細胞增殖，IC50為3.5μM。與特異性作用于前B細胞急性白血病（ALL）細胞抑制組成型激活的JAK2相一致，5μM酪氨酸磷酸化抑制劑AG490通過誘導程序性細胞死亡，幾乎完全抑制所有ALL細胞生長，而對正常造血功能不會造成有害影響。酪氨酸磷酸化抑制劑AG490不會抑制Lck,Lyn,Btk,Syk,和Src激活。

藥理研究^[3-4]

報道一、

毛成全等人通過酪氨酸磷酸化抑制劑AG490對JurkatT細胞活化、增殖、周期、凋亡及ICBP90蛋白表達的影響,探討阻斷JAK/STAT信號通路以抑制JurkatT細胞生長的可能性及其初步機制。方法:以JurkatT細胞為模型,應用雙熒光抗體標記結合流式細胞儀檢測酪氨酸磷酸化抑制劑AG490對JurkatT細胞表面分子CD69和CD25表達的影響;利用噻唑藍(MTT)比色法觀察酪氨酸磷酸化抑制劑AG490對JurkatT細胞增殖的影響;采用碘化丙錠(PI)染色檢測酪氨酸磷酸化抑制劑AG490對Jur-katT細胞周期的影響;應用AnnexinV-FITC和PI雙染色檢測酪氨酸磷酸化抑制劑AG490對JurkatT細胞凋亡的影響;Westernblot檢測酪氨酸磷酸化抑制劑AG490對JurkatT細胞中ICBP90蛋白表達的影響以確定其與酪氨酸磷酸化抑制劑AG490抑制JurkatT細胞增殖的關系。結果:隨著酪氨酸磷酸化抑制劑AG490濃度從1mmol/L增至30mmol/L,細胞停滯于G0/G1期,阻止其進入S期和G2/M期,導致JurkatT細胞ICBP90蛋白的表達顯著降低;AG490對細胞的抑制作用于24h最為明顯,抑制率可達27.37%,呈劑量依賴關系;酪氨酸磷酸化抑制劑AG490不能明顯抑制JurkatT細胞的活化或促進其凋亡。結論:酪氨酸磷酸化抑制劑AG490能明顯抑制JurkatT細胞的生長,其抑制作用可能通過下調JurkatT細胞ICBP90蛋白的表達與細胞周期阻滯有關,而不是通過促進細胞凋亡而實現。

報道二、

劉麗等人觀察了酪氨酸磷酸化抑制劑AG490對慢性粒細胞白血病細胞增殖的抑制作用,以及對增殖相關基因AKT蛋白表達的影響,為CML的治療,尤其是伊馬替尼耐藥的CML的治療提供了理論依據和實驗基礎。本實驗采用不同濃度的AG490分別作用于K562(人紅白血病細胞株)、32Dp210(小鼠髓系前體細胞株伊馬替尼敏感型)細胞24h、48h、72h,32Dp210-T315I(小鼠髓系前體細胞株伊馬替尼耐藥型)細胞6h、12h、24h,MTT檢測細胞增殖的抑制作用,隨后用不同濃度的酪氨酸磷酸化抑制劑AG490作用K562細胞16h,32Dp210細胞和32Dp210-T315I細胞6h,Westernblot檢測AKT蛋白及其磷酸化的表達情況,結果顯示酪氨酸磷酸化抑制劑AG490能抑制K562、32Dp210及32Dp210-T315I的增殖,其作用是時間依賴和劑量依賴,而且酪氨酸磷酸化抑制劑AG490對伊馬替尼耐藥細胞32Dp210-T315I的抑制作用更顯著。酪氨酸磷酸化抑制劑AG490能抑制AKT蛋白的磷酸化,呈濃度依賴作用,對AKT蛋白表達無明顯影響。酪氨酸磷酸化抑制劑AG490抑制細胞的增殖可能是由于AG490抑制AKT蛋白的磷酸化進而影響細胞增殖。

參考文獻

[1][學位論文]王彬2003-西安交通大學:外科學

[2]AG490PromotesHIF-1αAccumulationbyInhibitingItsHydroxylation.Fernandez-Sanchezetal.CurrMedChem.2012Aug1;19(23):4014-23

[3]毛成全,邢飛躍,郭中峰,方志遠.酪氨酸磷酸化抑制劑AG490抑制JurkatT細胞增殖[J].細胞與分子免疫學雜志,2010,26(03):214-217.

[4]劉麗.AG490對慢性粒細胞白血病細胞增殖的影響及其機理研究[D].吉林大學,2010.