14534-61-3 / 異綠原酸B的應用介紹

背景及概述^[1]

金銀花LoniceraeFlos為忍冬科植物忍冬LonicerajaponicaThunb.的干燥花蕾或初開的花，是我國常用中藥，具有清熱解毒、涼散風熱之功效、常用于熱血毒痢、風熱感冒、癰腫疔瘡、瘟病發熱等疾病。金銀花中含有大量的有機酸類化合物，主要藥理活性有抗菌作用、抗炎、抑制血小板聚集、抗血栓、抗氧化作用等。

異綠原酸A、B和C是二咖啡酰奎寧酸類化合物，是金銀花中的有效活性成分，是一類由奎寧酸與數目不等的咖啡酸通過酯化反應縮合而成的有機酸類天然成分，廣泛存在于植物界中。近20年來國內外學者就二咖啡酰奎寧酸類的植物化學和藥理進行了深入研究，發現其具有一些重要生物活性，極具臨床應用價值。主要的藥理活性有抗氧化、抑制氧酶、抗動脈粥樣硬化、抗動脈粥樣硬化、抗血小板活性物質、調血脂、抗炎、抗病毒、抑制組胺釋放、抗纖維化、抑制平滑肌收縮等作用。異綠原酸B（isochlorogenicacidB，ICAB），又名3，4-二咖啡酰奎寧酸，是從藥用植物金銀花中提取的一種多酚類化合物。異綠原酸B是雙黃連口服液的成分之一，同時也是存在于熱毒寧注射液中的抗氧化物質。目前，關于異綠原酸B的藥理學研究較少。已有研究證實異綠原酸B具有抗氧化、保肝和抗神經退行性疾病的生物活性。此外，分子對接實驗表明，異綠原酸B可能是磷酸二酯酶-5（phosphodiesteras-5，PDE-5）受體的強力抑制劑。

應用^[1]

異綠原酸B與綠原酸相比具有更多的酚羥基，被證實比綠原酸具有更好的抗氧化和抗神經退行性疾病的藥理作用。有實驗研究異綠原酸B（異綠原酸B）對四氯化碳（CCl4）致小鼠急性肝損傷的保護作用。建立CCl4誘導小鼠急性肝損傷實驗模型并評價異綠原酸B的保護作用，測定小鼠血清丙氨酸轉氨酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉移酶（AST）水平和肝組織丙二醛（MDA）含量，以及超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）的活性。采用HE染色對肝組織細胞形態進行觀察；Western印跡法測定異綠原酸B對肝損傷小鼠肝細胞中核因子E2相關因子2（Nrf2）、血紅素氧合酶-1（HO-1）和醌氧化物還原酶1（NQO1）表達的影響。結果顯示異綠原酸B各給藥組（5、10和20mg/kg）均可不同程度抑制CCl4所致小鼠血清ALT、AST和MDA的升高（P＜0.01），異綠原酸B高劑量組（20mg/kg）明顯提高肝細胞中SOD（P＜0.01）和GSH-Px活性水平（P＜0.05），降低MDA含量。同時，異綠原酸B能改善CCl4造成的肝組織病理學損傷。此外，異綠原酸B可促進Nrf2的表達及Nrf2的核轉位，進而促進Nrf2下游靶蛋白HO-1和NQO1的表達。因此異綠原酸B對CCl4引起的小鼠急性肝損傷具有明顯的保肝降酶作用，其作用機制可能與參與調節Nrf2信號通路、緩解氧化應激相關。

此外，研究表明異綠原酸A、B、C抑制人外周血多形核白細胞中鈣離子A23187誘導的白三烯B4產生，并且異綠原酸B能促進前列腺素E2的形成，呈現較好的抗炎活性。

制備^[2]

取金銀花10.0kg，用10倍量70%乙醇回流提取2h，濾渣加8倍量70%乙醇回流提取1h，合并提取液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度1.05（25℃）。攪拌加入乙醇至體積分數為80%，靜置過夜（12h），濾過，濾液減壓濃縮至無醇味，加水稀釋至1∶1，靜置過夜（12h），濾過，棄去不溶物，即得金銀花提取液，備用。異綠原酸A、B和C的轉移率為92.6%。將乙腈溶液作為A相，0.5%甲酸水溶液為B相，將2個灌注管路分別放入A相和B相中，然后進入洗脫程序表按照優選的溶劑體系比例進行設定（A相32%，B相68%），時間30min，體積流量20mL/min，再進入紫外檢測器的選擇系統，設定波長為326nm。將自制C18填料色譜柱（400mm×80mm，50μm）安裝好，取“2.3.3”項下異綠原酸粗品30.0g，用適量甲醇溶解，分次進樣，按上述條件洗脫，并收集保留時間為10.8～12.5、14.2～16.8和18.5～22.0min的組分，減壓濃縮收集液，冷凍干燥，并計算收率（收率＝制備得到的目標成分量/粗品中目標成分量）得異綠原酸A白色粉末4.08g（收率為86.6%）、異綠原酸B白色粉末2.03g（收率為81.5%）和異綠原酸C白色粉末8.17g（收率為88.1%）

主要參考資料

[1] 異綠原酸B對四氯化碳致小鼠急性肝損傷的保護作用

[2] 異綠原酸A、B和C的制備工藝研究