214217-86-4 / 2-羥基阿托伐他汀的含量檢測

背景及概述^[1]

阿托伐他汀為他汀類血脂調節藥，屬HMG-CoA還原酶抑制劑前體。口服吸收后的水解產物在體內競爭性地抑制膽固醇合成過程中的限速酶，使膽固醇的合成減少，低密度脂蛋白受體合成增加，使血膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇水平降低，中度降低血清甘油三酯水平和增高血高密度脂蛋白水平。適用于治療高膽固醇血癥和混合型高脂血癥，可用于冠心病和腦中風的防治。2-羥基阿托伐他汀為阿托伐他汀的代謝產物。阿托伐他汀在人體內主要由細胞色素P450酶代謝為2-羥基阿托伐他汀(ortho-hydroxyatorvastatin，o-OAT)和4-羥基阿托伐他汀(para-hydroxyatorvastatin，p-OAT)。2-羥基阿托伐他汀和p-OAT占總體抑制活性的70％。同其他他汀類化合物一樣，阿托伐他汀、2-羥基阿托伐他汀和p-阿托伐他汀結構中含有羥基羧酸結構，無論在體內和體外均能脫水關環形成內酯，并且，該體內內酯代謝物在體外也易于水解轉化為羥基羧酸，因而，羥基羧酸濃度測定易受影響不準確。

含量檢測^[2]

檢測人血漿中阿托伐他汀及代謝物的液相色譜-串聯質譜方法，含下述步驟：預處理，取血漿，加入阿托伐他汀及代謝物同位素內標溶液，以6M醋酸銨水溶液和乙腈為鹽析分層試劑沉淀蛋白，渦流及離心后制得血漿樣品；色譜，將血漿樣品液相色譜分離，采用KinetexXBC18柱，梯度洗脫，流動相A:流動相B初始體積比為60:40，流速0.8mL/min，柱溫40℃，流動相A為水，流動相B為乙腈；質譜，電噴霧電離源，正離子多反應監測(+MRM)掃描，噴霧電壓5500V，內源氣體1(N2)65psi，氣體2(N2)75psi，氣簾氣體(N2)35psi，離子源溫度500℃，阿托伐他汀反應監測離子[M+H]+m/z559→m/z440，CE22eV，D5-阿托伐他汀反應監測離子[M+H]+m/z564→m/z445，CE22eV，2-羥基阿托伐他汀和4-羥基阿托伐他汀反應監測離子[M+H]+m/z575→m/z440，CE34eV，D5-鄰羥基阿托伐他汀和D5-對羥基阿托伐他汀反應監測離子[M+H]+m/z580→m/z445，CE34eV；計算，以阿托伐他汀及代謝物濃度為橫坐標，阿托伐他汀及代謝物與阿托伐他汀及代謝物內標物的峰面積比為縱坐標，回歸制得相應標準曲線方程，計算阿托伐他汀及代謝物的血藥濃度。

主要參考資料

[1] 常用新藥精匯手冊

[2] CN201710281072.1檢測人血漿中阿托伐他汀及代謝物的液相色譜?串聯質譜方法及臨床藥動學研究的應用