33996-58-6 / 乙拉西坦的應(yīng)用

背景及概述^[1]

乙拉西坦是左乙拉西坦的消旋體，同時(shí)也是左乙拉西坦合成中的一種雜質(zhì)。左乙拉西坦(levetiracetam)，化學(xué)名為(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺。它是比利時(shí)UCB公司開(kāi)發(fā)的第二代乙酰膽堿激動(dòng)劑，用于治療局限性及繼發(fā)性全身性癲癇，于2000年4月獲得美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市。

應(yīng)用^[1]

乙拉西坦可用于左乙拉西坦原料的質(zhì)量研究。

左乙拉西坦為手性化合物，其右旋體［（ R）－2－（ 2－氧代－1－吡咯烷）丁酰胺對(duì)于抑制癲癇發(fā)作只有輕微或者不明顯的藥效作用。合成藥物所用的原料的質(zhì)量常常直接影響產(chǎn)品的質(zhì)量，為保證產(chǎn)品左乙拉西坦的質(zhì)量安全、 穩(wěn)定、 有效，對(duì)其原料藥理化性質(zhì)的各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行質(zhì)量考核極為必要。

右異構(gòu)體的測(cè)定：

試劑：正己烷（色譜純）、 無(wú)水乙醇（色譜純）；樣品：混旋乙拉西坦（自制）、 左乙拉西坦（自制）；色譜柱：手性色譜柱；流動(dòng)相：V （正己烷） ∶V （無(wú)水乙醇） =4∶1；檢測(cè)波長(zhǎng)：215 nm；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣量：20μL.

1.系統(tǒng)適用性 取乙拉西坦消旋體樣品適量，精密稱量，加流動(dòng)相溶解并稀釋至 0.1 mg/mL，作為系統(tǒng)適用性溶液，并取 20 μL，注入液相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣 5 次，記錄色譜圖。

2.空白試驗(yàn) 取流動(dòng)相 20μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，結(jié)合系統(tǒng)適用性試驗(yàn)圖譜，表明空白溶劑無(wú)干擾。

3.專屬性 ①高溫破壞試驗(yàn)：取 60 ℃高溫破壞的左乙拉西坦樣品適量，加少量無(wú)水乙醇溶解，用流動(dòng)相稀釋至 10 mg/mL，作為供試品溶液，并取 20 μL 注入液相色譜儀，記錄色譜圖，主峰與各雜質(zhì)峰完全分離，且各雜質(zhì)間分離良好. ②強(qiáng)光破壞試驗(yàn)：取強(qiáng)光破壞的左乙拉西坦樣品適量，加少量無(wú)水乙醇溶解，用流動(dòng)相稀釋至 10 mg/mL，作為供試品溶液，并取 20 μL 注入液相色譜儀，記錄色譜圖，主峰與各雜質(zhì)峰完全分離，且各雜質(zhì)間分離良好。 ③未破壞試驗(yàn)：取左乙拉西坦適量，加少量無(wú)水乙醇溶解，用流動(dòng)相稀釋至 10 mg/mL，作為供試品溶液，并取 20 μL 注入液相色譜儀，記錄色譜圖，主峰與各雜質(zhì)峰分離良好.

4.檢測(cè)限和定量限 取混旋乙拉西坦樣品適量，加流動(dòng)相溶解并定量稀釋，取 20 μL 注入液相色譜儀，記錄色譜圖，檢測(cè)限濃度約為 0.4 μg/mL，檢測(cè)限為 8.02 ng；定量限濃度為 0.8 μg/mL，定量限為 17.02 ng.

5.線性與范圍 取乙拉西坦消旋體樣品適量，加流動(dòng)相溶解并稀釋至濃度 0．1 mg/mL，作為儲(chǔ)備溶液；取 10，5，2，1，0．5 mL 各兩份，分別置 10 mL 量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為線性實(shí)驗(yàn)溶液。分別量取各線性試驗(yàn)溶液 20μL 注入液相色譜儀，記錄色譜圖。由線性試驗(yàn)結(jié)果知，色譜條件符合檢測(cè)要求。

6.重復(fù)性 取乙拉西坦消旋體樣品適量，加流動(dòng)相溶解并稀釋至濃度 0.1 mg/mL 的溶液，取 20μL 注入液相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣 5 次，記錄色譜圖。由重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果知，RSD 值均小于 2 ％，色譜條件符合檢測(cè)要求.

7.精密度 取乙拉西坦消旋體樣品適量，加流動(dòng)相溶解并稀釋至濃度 0．2 mg/mL，作為儲(chǔ)備液；取 6，5，4 mL，分別置于 10 mL 量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為精密度試驗(yàn)溶液；取 20 μL 儲(chǔ)備液和試驗(yàn)液注入液相色譜儀，重復(fù)進(jìn)樣 3 次，記錄色譜圖. 由精密度試驗(yàn)結(jié)果知，色譜條件符合檢測(cè)要求.

8.穩(wěn)定性 取乙拉西坦消旋體樣品適量，加流動(dòng)相溶解并稀釋至濃度 0.1 mg/mL，作為穩(wěn)定性試驗(yàn)溶液，分別于配置后的 0，1，2，3，4，5，6 h 測(cè)定. 取 20 μL 乙拉西坦消旋體樣品和穩(wěn)定性試驗(yàn)溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜圖. 由穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果知，重復(fù)進(jìn)樣的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不超過(guò) 2.0 ％，色譜條件符合檢測(cè)要求。

9.右異構(gòu)體的含量 分別取 090801＃，090802＃，090803＃ 左乙拉西坦適量，用流動(dòng)相稀釋至濃度 10 mg/mL，作為供試品溶液；另取左乙拉西坦對(duì)照品，加流動(dòng)相溶解并定量稀釋至濃度 50μg/mL，作為對(duì)照品溶液。分別量取 2μL 供試品和對(duì)照品，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，右異構(gòu)體含量測(cè)定結(jié)果為 090801＃，0.030 ％；090802＃，0.033 ％；090803＃，0.032 ％。

主要參考資料

[1]楊靜,化林,李洪鑫,吳淑飛,李海超.左乙拉西坦原料的質(zhì)量研究[J].河南科學(xué),2011,29(11):1313-1315.