480-81-9/千里光菲靈堿的制備和生物活性研究

背景及概述^[1]

千里光菲靈堿，屬吡咯生物堿類化合物，小菱形片狀結晶，易溶于氯仿、氯化乙烯，微溶于乙醇、丙酮，難溶于乙醚、石油醚。來源于菊科千里光屬植物千里光的干燥全草，動物實驗顯示具有解痙作用，對氨甲酰膽堿(Carbachol)引起大鼠及兔的離體腸管的痙攣有較強的解痙作用。

制備^[1]

取千里光藥材原料1kg，粉碎至20目，加入90％乙醇溶液回流提取3次，合并提取液，加入其體積的0.8％的活性炭脫色，過濾得到脫色液，脫色液濃縮至浸膏，浸膏用5％的鹽酸水溶液溶解，過濾，濾液上D151陽離子交換樹脂，先用去離子水洗至中性，再用4LpH11的75％乙醇溶液洗脫，洗脫液減壓濃縮，調pH10，放置結晶，過濾得到結晶，結晶用丙酮回流溶解，趁熱過濾，放冷結晶，濾出結晶干燥即得產品5.3g，含量為88.7％。

生物活性研究^[2]

馬景蕃等人探討了千里光菲靈堿對人宮頸癌He La、Caski細胞增殖、自噬的影響及其可能的作用機制。MTT法檢測千里光菲靈堿對He La、Caski細胞增殖的影響;免疫熒光法檢測GFP-LC3/He La和GFP-LC3/Caski兩種細胞內自噬體的形成情況;免疫印跡法檢測千里光菲靈堿對自噬相關蛋白表達的影響;熒光共定位法檢測自噬體與溶酶體的融合情況;建立荷宮頸癌He La、Caski細胞移植瘤裸鼠模型,檢測千里光菲靈堿對移植瘤生長的抑制作用。結果顯示,千里光菲靈堿呈時間和劑量依賴性抑制He La、Caski兩種宮頸癌細胞的增殖;千里光菲靈堿可誘導He La、Caski細胞內自噬體的形成和LC3-II蛋白的增加及P62蛋白的減少,表明千里光菲靈堿可誘導He La、Caski細胞發生自噬;與單藥千里光菲靈堿相比,千里光菲靈堿聯合自噬下游抑制劑氯喹(CQ)顯著增加了LC3-II及P62的蛋白表達,同時熒光共定位顯示千里光菲靈堿誘導的自噬體可與溶酶體實現共定位,表明千里光菲靈堿可誘導完整自噬流;與單藥千里光菲靈堿相比,千里光菲靈堿聯合自噬上游抑制3-甲基腺嘌呤(3MA)劑顯著增加了LC3-II的蛋白表達,顯著降低了He La、Caski細胞的存活率,表明抑制自噬可增強千里光菲靈堿對宮頸癌細胞增殖的抑制作用;與單藥千里光菲靈堿相比,千里光菲靈堿聯合MEK抑制劑顯著降低了P-ERK1/2的蛋白表達,減少了自噬體的形成,表明千里光菲靈堿誘導的He La、Caski細胞自噬依賴于MEK/ERK1/2途徑;另外,千里光菲靈堿可顯著抑制宮頸癌細胞裸鼠皮下移植瘤的生長。

應用^[3]

CN201711488595.X報道了殺滅空氣霉菌傳染病毒的熏蒸植物納米脂制備方法及應用，原料由杜仲脂、羥基環十五酮、千里光菲靈堿、高純度左旋龍腦、納米銀溶膠、麝香、肉桂醛配制成的薰蒸植物納米脂。解決了無孔不入熏蒸殺滅室內空氣中霉菌、軍團菌、傳染性病菌、病毒的獨創性。解決了人群中使用持續不斷動態高效殺滅傳染流感、殺滅人與人呼吸道傳播的獨創性。實現了人機同一室，產品無毒、無副作用、熏蒸植物納米脂,升華氣體1-30納米懸浮在室內空氣中達到殺滅有害病菌、病毒，預防疾病的傳播，應用于空調、汽車、空氣凈化器、高鐵、火車、飛機、輪船、集裝箱、居室、學校、幼兒院、醫院、賓館、公共場所等使用，具有應用前景廣闊。

參考文獻

[1][中國發明]CN201110117945.8一種千里光菲靈堿的提取方法

[2]馬景蕃,張燕,葉甘萍,韋啟良,邱龍新.千里光菲靈堿誘導MEK/ERK1/2介導的宮頸癌細胞自噬效應[J].中國藥科大學學報,2018,49(05):616-623.

[3] CN201711488595.X殺滅空氣霉菌傳染病毒的薰蒸植物納米脂制備方法及應用