545-97-1/赤霉素的制備方法

背景及概述^[1-2]

赤霉素是一種通過(guò)發(fā)酵生產(chǎn)的植物生長(zhǎng)激素。其化學(xué)結(jié)構(gòu)屬于二萜類酸，由四環(huán)骨架衍生而 得。可刺激葉和芽的生長(zhǎng)。已知的赤霉素類至少有38種。赤霉素應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，在某 些方面有較好效果。例如提高無(wú)籽葡萄產(chǎn)量，打破馬鈴薯休眠；在釀造啤酒時(shí)，用GA3 來(lái)促進(jìn)制備麥芽糖用的大麥種子的萌發(fā)；當(dāng)晚稻遇陰雨低溫而抽穗遲緩時(shí)，用赤霉素處理 能促進(jìn)抽穗；或在雜交水稻制種中調(diào)節(jié)花期以使父母本花期相遇等。

制備^[1-2]

報(bào)道一、

一種赤霉素的固液提取純化方法，包括以下工藝步驟：

A、將LD601大孔樹(shù)脂100ml置于燒杯中，用自來(lái)水清洗數(shù)次；濾去自來(lái)水加入部分酒精 浸泡樹(shù)脂；將樹(shù)脂連同酒精一起轉(zhuǎn)移到層析柱中；

B、用酒精以90ml/h的流速洗滌樹(shù)脂至流出酒精于水中不產(chǎn)生白色渾濁為止；用去離子 水洗去層析柱內(nèi)的殘留酒精；

C、以200ml/h的流速讓赤霉素發(fā)酵液流過(guò)樹(shù)脂層析柱；赤霉素發(fā)酵液通完后，用去離子 水洗去層析柱內(nèi)殘留的發(fā)酵液；

D、用酒精溶液以100ml/h的流速洗脫層析柱中樹(shù)脂吸附的赤霉素；

E、收集流出液；濃縮洗脫液即得赤霉素產(chǎn)品。

報(bào)道二、

1）板框過(guò)濾

某廠家的赤霉素發(fā)酵液經(jīng)過(guò)200目的板框過(guò)濾，濃縮液經(jīng)過(guò)水洗再次壓濾，將板框?yàn)V 液和水洗后的壓濾液合并，作為超濾膜的進(jìn)料液。

2）超濾除雜

板框?yàn)V液經(jīng)過(guò)分子截留量為8萬(wàn)的卷式超濾膜濃縮，濃縮約60倍，超濾濃縮液回板 框再次壓濾，而超濾透析液作為連續(xù)離交的進(jìn)料。

3）連續(xù)離交吸附解析

超濾膜濾液為黃色澄清液體,pH5.0,效價(jià)1809mg/ml,用硫酸調(diào)節(jié)pH至3后進(jìn)連續(xù) 移動(dòng)床系統(tǒng)進(jìn)行吸附解析，移動(dòng)床采用20-4型設(shè)備（20-4指柱子根數(shù)為20，設(shè)備閥口 內(nèi)徑為4mm），旋轉(zhuǎn)周期15H，裝填樹(shù)脂4.5L，樹(shù)脂為Amberlite XAD-16非離子型大 孔樹(shù)脂。移動(dòng)床分為進(jìn)料區(qū)、吸附水洗區(qū)、解析液頂水區(qū)、解析區(qū)、水反頂雜質(zhì)區(qū)和水 壓樹(shù)脂區(qū)。

其中，稀酸采用pH2~3的硫酸水，解析劑采用70%的甲醇；操作條件為進(jìn)料 95ml/min，稀酸頂料12ml/min，解析液頂水4ml/min，解析10ml/min，水頂雜質(zhì)30ml/min， 水壓樹(shù)脂30ml/min；連續(xù)離交的收率在98.2%。

檢測(cè)得到的解吸液中赤霉素的含量為28138μg/ml，而納濾濃縮只能達(dá)到10000μ g/ml左右的含量，所以可大大減少后續(xù)蒸發(fā)結(jié)晶的生產(chǎn)負(fù)荷。

4）產(chǎn)品純度

解吸液回收甲醇后，轉(zhuǎn)至水相，乙酸乙酯萃取，萃取液濃縮結(jié)晶得到赤霉素粉劑， 所得粉劑效價(jià)912r/mg以上，其中GA3含量91.4%。

參考文獻(xiàn)

[1] [中國(guó)發(fā)明] CN201710496847.7 一種赤霉素的固液提取純化方法

[2] [中國(guó)發(fā)明,中國(guó)發(fā)明授權(quán)] CN201210583346.X 從發(fā)酵液中提取赤霉素的方法