產(chǎn)品詳情

雞卵泡顆粒細胞

基本信息

產(chǎn)品名稱 ： 雞卵泡顆粒細胞

產(chǎn)品品牌 ： 紀寧生物

組織來源 ： 雞卵泡組織

產(chǎn)品規(guī)格 ： 5×105cells/T 25細胞培養(yǎng)瓶

細胞簡介

雞卵泡顆粒細胞分離自雞卵泡組織。成熟卵泡是卵巢的組織結(jié)構(gòu)成分之一，卵泡腔很大，卵丘很明顯。卵泡內(nèi)膜細胞緊靠卵泡顆粒層，與顆粒層細胞之間有一層基膜相隔，內(nèi)膜細胞呈多邊形，胞質(zhì)清亮，胞核圓形，細胞間可見許多毛細血管，外膜細胞位于最外層，多呈梭形，與周圍結(jié)締組織分界不明顯。

卵泡(follicle) 中卵母細胞四周有一層菱形或扁平細胞圍繞，在卵泡開始發(fā)育、卵細胞成長的同時，周圍的菱形細胞變?yōu)榱⒎叫危⒂蓡螌釉錾蓮?fù)層，因其細胞漿內(nèi)含有顆粒，故稱為顆粒細胞。初級卵泡的顆粒細胞為單層。次級卵泡的顆粒細胞增至復(fù)層。成熟卵泡的顆粒細胞展開又變?yōu)閱螌?。顆粒細胞的胞核大而圓，著色深，細胞的游離面有許多細長突起伸入放射帶的凹陷部。

方法簡介

紀寧生物實驗室分離的雞卵泡顆粒細胞采用先機械分離后膠原酶-胰蛋白酶聯(lián)合消化法、并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

質(zhì)量檢測

紀寧生物實驗室分離的雞卵泡顆粒細胞經(jīng)FSH R 免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息

培  養(yǎng) 基 ： 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等

換液頻率 ： 每2-3天換液一次

生長特性 ： 貼壁

細胞形態(tài) ： 上皮細胞樣

傳代特性 ： 可傳1代

傳代比例 ： 1:2

消  化 液 ： 0. 25% 胰蛋白酶

培養(yǎng)條件 ： 氣相 ： 空氣，95% 。C O2，5%

雞卵泡顆粒細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用紀寧生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

使用方法

雞卵泡顆粒細胞是一種貼壁細胞，細胞形態(tài)呈上皮細胞樣，在紀寧生物技術(shù)部標準操作流程下，細胞可傳1代。建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作

1. 取出T 25細胞培養(yǎng)瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化

1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次。

2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

3. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0. 1m g/m l），明膠（0. 1% ），依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

雞卵泡顆粒細胞
注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和紀寧生物技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。