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雞外周血淋巴細(xì)胞
基本信息
產(chǎn)品名稱 ： 雞外周血淋巴細(xì)胞
產(chǎn)品品牌 ： 紀(jì)寧生物
組織來(lái)源 ： 外周血
產(chǎn)品規(guī)格 ： 5×105cells/T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞簡(jiǎn)介
雞外周血淋巴細(xì)胞分離自外周血；所謂的外周血，即除骨髓之外的血液，就是已經(jīng)被造血器官釋放入循環(huán)系統(tǒng)參與循環(huán)的血，它區(qū)別于造血器官內(nèi)的未成熟的血細(xì)胞或未被釋放入循環(huán)的血細(xì)胞。外周血淋巴細(xì)胞(Peripheral Blood Lymphocyte)簡(jiǎn)稱PBL，主要是血液循環(huán)中的淋巴細(xì)胞，由T細(xì)胞和B細(xì)胞組成，其中T細(xì)胞(占70%～80%)和B細(xì)胞(占20%～30%)。
方法簡(jiǎn)介
紀(jì)寧生物實(shí)驗(yàn)室分離的雞外周血淋巴細(xì)胞采用取外周血、通過(guò)密度梯度離心法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為1×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
紀(jì)寧生物實(shí)驗(yàn)室分離的雞外周血淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)檢測(cè)，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 ： 含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 ： 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 ： 懸浮
細(xì)胞形態(tài) ： 圓形
傳代特性 ： 不增殖；不傳代
消 化 液 ： 0. 25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 ： 氣相 ： 空氣，95% 。C O2，5%
雞外周血淋巴細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用紀(jì)寧生物配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
使用方法
雞外周血淋巴細(xì)胞是一種懸浮細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)呈圓形，在紀(jì)寧生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，細(xì)胞不增殖；不傳代；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作
1 .取出T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次。
2)添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4)待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3.細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí)，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn)；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1m g/m l），明膠（0.1% ），依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被。
雞外周血淋巴細(xì)胞
注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和紀(jì)寧生物技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。