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基本信息
產品名稱 ： 雞心臟微血管內皮細胞
產品品牌 ： 紀寧生物
組織來源 ： 心臟組織
產品規格 ： 5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
雞心臟微血管內皮細胞分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中最重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成，左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以供應氧和各種營養物質，并帶走代謝的終產物（如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等），使細胞維持正常的代謝和功能。
心臟微血管內皮細胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細胞，它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節血壓、抗血栓形成等有重要作用，在心臟血管疾病的發病機制中有重要病理生理學意義。近年來大量研究表明，心肌微血管內皮細胞的功能和病理改變直接影響心肌細胞功能，也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位，其作為體外研究的細胞模型在心肌缺血-再灌注發病機制和細胞間旁分泌細胞生長因子研究中起著重要作用。
方法簡介
紀寧生物實驗室分離的雞心臟微血管內皮細胞采用膠原酶 - 中性蛋白酶混合消 化法結合密度梯度離心法、最后通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶 。
質量檢測
紀寧生物實驗室分離的雞心臟微血管內皮細胞經C D 31免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
包被條件 ： PLL（0.1m g/ml），明膠（0.1%）
培 養 基 ： 含FBS、EG F、bFG F、IG F、V EG F、H eparin、H ydrocortisone、P enicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ： 每2-3天換液一次
生長特性 ： 貼壁
細胞形態 ： 內皮細胞樣
傳代特性 ： 可傳1-2代
培養條件 ： 氣相 ： 空氣，95% 。C O2，5%
雞心臟微血管內皮細胞體外培養周期有限。建議使用紀寧生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
雞心臟微血管內皮細胞是一種貼壁細胞，細胞形態呈內皮細胞樣，在紀寧生物技術部標準操作流程下，細胞可傳1-2代；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作
1.取出T 25細胞培養瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2.貼壁細胞消化
1）吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。
2）添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入3-5ml完全培養基終止消化。
3）用吸管輕輕吹打混勻，調整合適密度按實驗需求接種對應實驗器皿，然后按器皿大小補充適當新鮮的完全培養基，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4）待細胞完全貼壁后，培養觀察，用于實驗；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3.細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1m g/m l），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和紀寧生物技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
