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基本信息
產品名稱 ：小鼠肝枯否細胞
產品品牌 ：紀寧生物
組織來源 ：肝臟組織
產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶
細胞簡介
小鼠枯否細胞分離自肝臟組織。肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用。肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里最大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。
肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態結構 ：肝臟位于右上腹，隱藏在右側膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復蓋，僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。枯否氏細胞(K upffer細胞) 是肝臟的肝血竇內一些固定于竇壁的巨噬細胞，它能吞噬和清除大部分從腸道來的抗原微粒，并能吞噬和清除肝血竇中的細菌、異物和衰老的紅細胞，并把血紅蛋白分解成膽紅素。
此外，肝巨噬細胞也有處理抗原，誘導T細胞增殖，參與免疫調節的作用。枯否氏細胞和一般巨噬細胞不同，枯否氏細胞不具有增加抗原免疫原性的能力，相反有消除或減弱抗原性的作用。枯否氏細胞能吞噬來自血液循環的抗原抗體復合物和其他有害物質，以消除這些物質對機體的損害。枯否細胞功能障礙可導致腸源性內毒素血癥。電鏡下有很多皺褶和微絨毛。
方法簡介
紀寧生物實驗室分離的小鼠肝枯否細胞采用混合酶灌流消化、低速離心、密度梯度離心、差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。
質量檢測
紀寧生物實驗室分離的小鼠肝枯否細胞經C D 68免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 ：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：貼壁
細胞形態 ：梭形、巨噬細胞
傳代特性 ：屬于終末分化細胞。屬于不增殖細胞群
傳代比例 ：不傳代
消 化 液 ：利多卡因(12m M )
培養條件 ：氣相 ：空氣，95% 。C O2，5%
小鼠肝枯否細胞體外培養周期有限。建議使用酶聯生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
小鼠肝枯否細胞是一種貼壁細胞，細胞形態呈梭形、巨噬細胞，在紀寧生物技術部標準操作流程下，細胞屬于終末分化細胞。屬于不增殖細胞群。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作
1. 取出T 25細胞培養瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 特殊細胞消化一
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加利多卡因(12m M ) 消化液1m L至培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，37℃溫浴3min(不能超過5min) 。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5m l完全培養基稀釋消化液。
3) 用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞，吸出細胞懸液，經1200rpm 離心5min，丟棄上清。
4) 用完全培養基重懸細胞，計數接種于相應實驗器具內，待細胞完全貼壁后開始試驗(預計
2h 貼壁，12-24h 完全展開) 。
5) 待細胞完全貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 特殊細胞消化二
1) 若細胞無法消化，更換消化液為0. 25% 胰蛋白酶，按照上述消化一方案操作。
2) 若仍然無法消化，加入3ml完全培養基終止消化，采用無菌細胞刮，直接刮取細胞(此法
不推薦，最后選擇，會造成細胞機械損傷死亡) 。
小鼠肝枯否細胞
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和紀寧生物技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們紀寧系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
