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大鼠骨細胞

品牌:紀寧生物

貨號:JN25537

規(guī)格: 5×10?Cells

聯(lián)系方式:021-54721350

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產(chǎn)品詳情

大鼠骨細胞
基本信息
產(chǎn)品名稱 : 大鼠骨細胞
產(chǎn)品品牌 : 紀寧生物
組織來源 : 骨組織
產(chǎn)品規(guī)格 : 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


細胞簡介  

大鼠骨細胞分離自骨組織;骨組織的細胞成分包括骨原細胞、成骨細胞、骨細胞和破骨細胞。只有骨細胞存在于骨組織內(nèi),其他三種細胞均位于骨組織的邊緣。骨細胞(O steocyte)是人體骨骼中最主要的細胞成分。在成年人骨骼中,骨細胞占細胞總數(shù)量的90% ~95%,大約是成骨細胞數(shù)量的20倍。骨細胞生長在骨骼內(nèi)部的骨基質(zhì)中。骨細胞的細胞體呈梭形或類圓形,位于基質(zhì)構(gòu)成的骨陷窩內(nèi)。與神經(jīng)細胞類似,每個骨細胞具有大量向外延伸的突觸,而這些突觸均位于由骨基質(zhì)構(gòu)成的骨小管結(jié)構(gòu)中。通過這些突觸,骨細胞能夠與骨表面的細胞、周圍其它的骨細胞進行“交流”。普遍認為,骨細胞起源于成骨細胞。

在骨形成的終末階段,成骨細胞將可能有3種不同的歸宿:分化成為骨細胞、轉(zhuǎn)移至骨表面成為暫不活動的成骨細胞、進入程序死亡過程(凋亡)。骨細胞為扁橢圓形多突起的細胞,核亦扁圓、染色深。胞質(zhì)弱嗜堿性。電鏡下,胞質(zhì)內(nèi)有少量溶酶體、線粒體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),高爾基復合體亦不發(fā)達。骨細胞夾在相鄰兩層骨板間或分散排列于骨板內(nèi)。相鄰骨細胞的突起之間有縫隙連接。在骨基質(zhì)中,骨細胞胞體所占據(jù)的橢圓形小腔,稱為骨陷窩,其突起所在的空間稱骨小管。相鄰的骨陷窩借骨小管彼此通連。骨陷窩和骨小管內(nèi)均含有組織液,骨細胞從中獲得養(yǎng)分。


方法簡介

紀寧生物實驗室分離的大鼠骨細胞采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10 5cells/瓶 。


質(zhì)量檢測

紀寧生物實驗室分離的大鼠骨細胞經(jīng)骨鈣素免疫熒光鑒定,純度可達90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

培 養(yǎng) 基 : 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :  每2-3天換液一次
生長特性 :  貼壁
細胞形態(tài) :  梭形、多角形
傳代特性 :  不增殖;不傳代
傳代比例 :  不傳代
消 化 液 :  0.25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 :  氣相:空氣,95% ;C O2,5%
大鼠骨細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用紀寧生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片


使用方法

大鼠骨細胞是一種貼壁細胞,細胞形態(tài)呈梭形、多角形,在紀寧生物技術(shù)部標準操作流程下,細胞不增殖;不傳代;建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗。


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1.取出T 25細胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2.貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2)添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入3-5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3)用吸管輕輕吹打混勻,調(diào)整合適密度按實驗需求接種對應實驗器皿,然后按器皿大小補充適當新鮮的完全培養(yǎng)基,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4)待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察,用于實驗;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1m g/m l),明膠(0.1% ),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


大鼠骨細胞

注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和紀寧生物技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們紀寧系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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