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大鼠頸動脈血管平滑肌細胞

品牌:紀寧生物

貨號:JN25617

規格: 5×10?Cells

聯系方式:021-54721350

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產品詳情

大鼠頸動脈血管平滑肌細胞
基本信息
產品名稱 : 大鼠頸動脈血管平滑肌細胞
產品品牌 : 紀寧生物
組織來源 : 頸動脈組織
產品規格 : 5×105cells/T25細胞培養瓶


細胞簡介  

大鼠頸動脈平滑肌細胞分離自頸動脈組織;頸動脈存在于脊椎動物頸部的動脈。有頸外動脈和頸內動脈。前者分布至頭頂部和顏面部。后者進入顱內分布至腦和眼眶內。在發生時,鰓弓中不形成鰓的下頜弓,所以,從大動脈也不分入鰓動脈和出鰓動脈。從腹大動脈的前方發出頸外動脈,頸內動脈是通向第三鰓弓的血管延伸而形成的,但在某些魚類、有尾兩棲類和爬行類中,這一血管也將一些血液送至大動脈根。其它的高等脊椎動物的大動脈根,在第三、第四大動脈弓之間消失,所以,其第三大動脈弓形成純粹的頸動脈。在相當于第三、第四大動脈弓之間的腹行大動脈的部分稱為頸總動脈干(com m on co-rotid trunk);高等脊椎動物,是由頸總動脈干分為左、右頸總動脈,然后再各分支為頸外動脈和頸內動脈。

頸動脈是將血液由心臟輸送至頭、面、頸部的大血管,是腦的主要供血血管之一,由內膜、平滑肌層及外膜層構成。與其相關常見疾病為頸動脈狹窄,頸動脈狹窄導致的缺血癥狀主要包括,頭暈、記憶力、定向力減退、意識障礙、黑朦、偏側面部和/或肢體麻木和/或無力、伸舌偏向、言語不利、不能聽懂別人說的話等。研究頸動脈平滑肌細胞的體外培養,為研究治療頸動脈狹窄提供一個細胞模型具有重要意義。


方法簡介

紀寧生物實驗室分離的大鼠頸動脈血管平滑肌細胞采用中性蛋白酶-膠原紀寧合消化法制備而來制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶 。


質量檢測

紀寧生物實驗室分離的大鼠頸動脈血管平滑肌細胞經α-SM A 免疫熒光鑒定,純度可達90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等


培養信息

培 養 基 : 培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :  每2-3天換液一次
生長特性 :  貼壁 
細胞形態 :  成纖維細胞樣 
傳代特性 :  可傳3代左右 
傳代比例 :  1:2
消 化 液 :  0.25% 胰蛋白酶
培養條件 :  氣相:空氣,95% ;C O2,5%
大鼠頸動脈血管平滑肌細胞體外培養周期有限;建議使用紀寧生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。


細胞培養狀態

發貨時發送細胞電子版照片


使用方法

大鼠頸動脈血管平滑肌細胞是一種貼壁細胞,細胞形態呈成纖維細胞樣,在紀寧生物技術部標準操作流程下,細胞可傳3代左右;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T 25細胞培養瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1) 收集T25細胞培養瓶中的培養基至50ml離心管中,用吸管吸取PBS,吹洗細胞培養瓶1-2次,收集清洗液;經1200-1500rpm 離心3min,棄上清,收集細胞沉淀①。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,收集細胞懸液至離心管中;經1200-1500rpm 離心3min,棄上清,收集細胞沉淀②。
4) 吸取5ml新鮮完全培養基,重懸細胞沉淀①、細胞沉淀②,把①、②混勻。
5) 用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞,按實驗需求接種于實驗器皿內,然后補充適量新鮮的
完全培養基,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
6) 待細胞狀態穩定后,用于實驗;可以每2-3天換液一次新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1m g/m l),明膠(0.1% ),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


大鼠頸動脈血管平滑肌細胞

注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和紀寧生物技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們紀寧系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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