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小鼠牙周膜成纖維細胞

品牌:紀寧生物

貨號:JN25630

規格: 5×10?Cells

聯系方式:021-54721350

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產品詳情

小鼠牙周膜成纖維細胞
基本信息
產品名稱 :小鼠牙周膜成纖維細胞
產品品牌 :紀寧生物
組織來源 :牙周膜組織
產品規格 :5×105cells/T25細胞培養瓶


細胞簡介  

小鼠牙周膜成纖維細胞分離自牙周膜組織。牙周膜(牙周韌帶、牙周間隙) 是由致密結締組織所構成。多數纖維排列成束,纖維的一端埋于牙骨質內,另一端則埋于牙槽窩骨壁里,使牙齒固位于牙槽窩內。牙周膜內有神經、血管、淋巴和上皮細胞等。成纖維細胞(Fibroblast) 是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。


成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化。成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的牙周膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起。6h后細胞基本貼壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團。

細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。牙周膜成纖維細胞(PLFs) 作為牙周膜的主體細胞,是牙周膜主要的間質細胞,它不僅具有合成膠原、基質、彈力纖維和糖蛋白的功能,還有吸收膠原吞噬異物的能力,還參與了牙周組織的病變、修復及再生過程。現在,利用牙周膜細胞建立體外模型,已經成為有關員研究牙周組織疾病的重要手段。


方法簡介

紀寧生物實驗室分離的小鼠牙周膜成纖維細胞采用膠原酶-胰蛋白紀寧合消化法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。

質量檢測

紀寧生物實驗室分離的小鼠牙周膜成纖維細胞經Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息

培 養 基 :含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態 :成纖維細胞樣
傳代特性 :可傳3代左右
傳代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白酶
培養條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%
小鼠牙周膜成纖維細胞體外培養周期有限。建議使用紀寧生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。

細胞培養狀態

發貨時發送細胞電子版照片

使用方法

小鼠牙周膜成纖維細胞是一種貼壁細胞,細胞形態呈成纖維細胞樣,在紀寧生物技術部標準操作流程下,細胞可傳3代左右。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。

客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T 25細胞培養瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0. 1m g/m l),明膠(0. 1% ),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

小鼠牙周膜成纖維細胞
注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和紀寧生物技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們紀寧系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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