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產品詳情

大鼠肺小動脈平滑肌細胞
基本信息
產品名稱 :大鼠肺小動脈平滑肌細胞
產品品牌 :紀寧生物
組織來源 :肺小動脈組織
產品規格 :5×105cells/T25細胞培養瓶


細胞簡介

大鼠肺小動脈平滑肌細胞分離自肺小動脈組織;小動脈(sm allartery), 管 徑 在 0.3~ 1mm 之間,小動脈包括粗細不等的幾級分支,也屬肌性動脈。較大的小動脈,內膜有明顯的內彈性膜,中膜有幾層平滑肌,外膜厚度與中膜相近,一般沒有外彈性膜。小動脈是決定周圍循環阻力大小的主要因素,也是調節微循環灌注量的“總開關”。典型的小動脈,其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2。

中膜的肌層相對比其他動脈為厚,當平滑肌在神經支配下強力收縮時,其管腔可以完全閉塞,而使血液不能流入它所分布的毛細血管內,從而增加了周圍血液循環的阻力。如果有許多小動脈同時收縮,可使血壓顯著上升。反之,當小動脈的平滑肌舒張時,則可使大量的血液流入毛細血管,外周阻力明顯下降,血壓降低。

終末小動脈(terminalarteri-ole)的口徑為20~30μm ;后小動脈(m etar-te riole),又稱毛細血管前小動脈(p recapil-lary arteriole)的口徑為12~15μm 。管壁內均有較稀疏的平滑肌,在毛細血管前小動脈分支的起始部分,管壁平滑肌成分增厚,叫做毛細血管前括約肌(p recapillary sphinc-ter),其收縮或舒張,可調節真毛細血管的血流量,是調節微循環灌注量的“分開關”。


方法簡介

紀寧生物實驗室分離的大鼠肺小動脈平滑肌細胞采用中性蛋白酶-膠原紀寧合消化法制備而來制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶 。


質量檢測

紀寧生物實驗室分離的大鼠肺小動脈平滑肌細胞經α-SM A 免疫熒光鑒定,純度可達9 0% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養信息

培 養 基 :  含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :  每2-3天換液一次
生長特性 :  貼壁 細胞形態 成纖維細胞樣 傳代特性 可傳2-3代 傳代比例 1:2
消 化 液 :  0.25% 胰蛋白酶
培養條件 :  氣相:空氣,95% ;C O2,5%
大鼠肺小動脈平滑肌細胞體外培養周期有限;建議使用紀寧生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。


細胞培養狀態

發貨時發送細胞電子版照片


使用方法

大鼠肺小動脈平滑肌細胞是一種貼壁細胞,細胞形態呈成纖維細胞樣,在紀寧生物技術部標準操作流程下,細胞可傳2-3代;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1.取出T 25細胞培養瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2.貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養基終止消化。
3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4)待細胞完全貼壁后,培養觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1m g/m l),明膠(0.1% ),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


大鼠肺小動脈平滑肌細胞

注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和紀寧生物技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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