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小鼠腦微血管周細胞

品牌:紀寧生物

貨號:JN25707

規(guī)格: 5×10?Cells

聯(lián)系方式:021-54721350

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產(chǎn)品詳情

小鼠腦微血管周細胞

基本信息

產(chǎn)品名稱 :小鼠腦微血管周細胞

產(chǎn)品品牌 :紀寧生物

組織來源 :大腦組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


細胞簡介

小鼠腦微血管周細胞分離自腦微血管。大腦分左右兩個半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì)) 覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個半球都有三個面,即外側(cè)面(約占整個皮質(zhì)面積的1/3) 、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積) 。半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積。大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。


由于三溝裂之界隔,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。周細胞(pericyte) 又稱R ouget細胞和壁細胞,是一種包圍全身毛細血管和靜脈中內(nèi)皮細胞的細胞,可以收縮。周細胞嵌入毛細血管內(nèi)皮細胞的基膜中,通過物理接觸和旁分泌信號與內(nèi)皮細胞進行細胞通訊,監(jiān)視和穩(wěn)定內(nèi)皮細胞的成熟過程。此外,周細胞還具有調(diào)控毛細血管血流量、細胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用,其多功能性是目前研究的熱點之一,所以對血管周細胞的生物學(xué)特征、標記物、細胞功能等的研究都為相關(guān)研究提供基礎(chǔ)資料。


周細胞產(chǎn)生手指狀的外延以調(diào)控毛細血管的血流量。周細胞和內(nèi)皮細胞之間共同擁有一個基膜,基膜上有多種細胞連接,包括多種整合素、神經(jīng)鈣黏素、纖連蛋白以及接合素。它還參與毛細血管直徑的雙向調(diào)控。毛細血管受損時,周細胞還可增殖,分化為內(nèi)皮細胞和成纖維細胞。


方法簡介

紀寧生物實驗室分離的小鼠腦微血管周細胞采用中性蛋白酶-膠原紀寧合消化法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。


質(zhì)量檢測

紀寧生物實驗室分離的小鼠腦微血管周細胞經(jīng)α-SM A 免疫熒光鑒定,純度可達90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

包被條件 :PLL(0. 1m g/ml)

培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等

換液頻率 :每2-3天換液一次

生長特性 :貼壁

細胞形態(tài) :成纖維細胞樣

傳代特性 :可傳1-3代左右

傳代比例 :1:2

消 化 液 :0. 25% 胰蛋白酶

培養(yǎng)條件 :氣相:空氣,95% 。C O2,5%

小鼠腦微血管周細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用紀寧生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片


使用方法

小鼠腦微血管周細胞是一種貼壁細胞,細胞形態(tài)呈成纖維細胞樣,在紀寧生物技術(shù)部標準操作流程下,細胞可傳1-3代左右。建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗。


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T 25細胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化

1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。

2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

3. 細胞收貨脫落

1) 收集所有細胞懸液,1000rpm ,離心5min,保留沉淀。

2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液0. 5m L至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min (或4℃冰箱靜置5-7min) 。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。

3) 經(jīng)1000rpm ,離心5min,丟棄上清,用5ml完全培養(yǎng)基(補加1% FBS,促進貼壁) 重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。

4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱) 。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0. 1m g/m l),明膠(0. 1% ),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


小鼠腦微血管周細胞
注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和紀寧生物技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們紀寧系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。


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