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小鼠脊髓微血管內皮細胞

品牌:紀寧生物

貨號:JN25806

規格: 5×10?Cells

聯系方式:021-54721350

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產品詳情

小鼠脊髓微血管內皮細胞
基本信息
產品名稱 :小鼠脊髓微血管內皮細胞 
產品品牌 :紀寧生物
組織來源 :脊髓組織
產品規格 :5×105cells/T25細胞培養瓶

細胞簡介  

小鼠脊髓微血管內皮細胞分離自脊髓組織。脊髓是細細的管束狀的神經結構,位于脊柱的椎管內且被脊椎保護。是源自腦的中樞神經系統延伸部分。中樞神經系統的細胞依靠復雜的聯系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經信息。人和脊椎動物中樞神經系統的一部分,在椎管里面,上端連接延髓,兩旁發出成對的神經,分布到四肢、體壁和內臟。脊髓的內部有一個H 形(蝴蝶型)灰質區,主要由神經細胞構成。在灰質區周圍為白質區,主要由有髓神經纖維組成。


脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發出許多成對的神經(稱為脊神經)分布到全身皮膚、肌肉和內臟器官。微血管又稱毛細血管。分布于各種組織和細胞間的最微細的血管。介于微動脈和微靜脈之間。平均直徑7~9微米,數量極多,成網狀分布。管壁由一層內皮細胞及一薄層基膜組成,厚約0. 5微米。基膜外面有薄層結締組織,其中有纖維細胞、巨噬細胞和周細胞等。最細的毛細血管由一個內皮細胞圍成管腔,較粗的毛細血管由2~3個內皮細胞圍成。分布于肌肉組織、神經組織和結締組織中的毛細血管,內皮細胞間為縫隙連接(縫隙寬150埃),稱連續毛細血管。分布于內分泌腺、腎臟等處的毛細血管,除有縫隙連接外,細胞本身有許多小孔,(孔徑800~1000埃),稱有孔毛細血管。

分布于肝、脾、骨髓及某些內分泌腺的毛細血管,管腔擴大,稱血竇。毛細血管的管壁薄、通透性大、管徑細(8~10微米)、數量多、血流速度慢,這些特點使其成為血液與組織液進行物質交換的場所,又稱交換血管。血竇(sinusoid)由毛細血管管腔擴大而成,竇壁的一般結構與毛細血管壁相同,由單層內皮 細胞構成,內皮細胞膜上有窗孔。不同器官的竇壁結構各有差別。脾血竇的內皮細胞間有較寬裂隙。

肝血竇內皮細胞是不連續的,有較寬的細胞隙(0. 1~0. 5微米)。肝、脾血竇的基膜不完整或無基膜,通透性比毛細血管大,較大的蛋白質和血細胞可以通過。肝血竇壁內有枯否細胞,脾血竇內外有巨噬細胞,這兩種細胞都有吞噬能力,可吞噬清除血液中的異物、細菌等有害物質,是機體單核巨噬細胞系統的重要組成分。某些內分泌腺的血竇有連續的基膜。


方法簡介

紀寧生物實驗室分離的小鼠脊髓微血管內皮細胞采用中性蛋白酶-膠原紀寧合消化法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。

質量檢測

紀寧生物實驗室分離的小鼠脊髓微血管內皮細胞經C D 31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息

包被條件 :PLL(0. 1m g/ml),明膠(0. 1%)
培 養 基 :含FBS、EG F、bFG F、IG F、V EG F、H eparin、H ydrocortisone、P enicil
lin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態 :內皮細胞樣
傳代特性 :可傳2-3代
傳代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白酶
培養條件 :氣相:空氣,95% 。C O2,5%
小鼠脊髓微血管內皮細胞體外培養周期有限。建議使用紀寧生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。

細胞培養狀態

發貨時發送細胞電子版照片

使用方法

小鼠脊髓微血管內皮細胞是一種貼壁細胞,細胞形態呈內皮細胞樣,在紀寧生物技術部標準操作流程下,細胞可傳2-3代。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。

客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T 25細胞培養瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS(37℃預熱)清洗細胞一次。
2)添加0. 25% 胰蛋白酶消化液0. 5m L至培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,37℃溫浴1min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養基終止消化。
3)用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4)待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后按換液頻率更換新鮮的完全培養基(37℃預熱)。
3. 復蘇操作說明
1. 準備好37度水浴鍋,預熱至37度。
2. 準備好T25培養瓶,加入10ml完全培養基(培養基量必須大于凍存液10倍體積)。
3. 取出干冰內凍存細胞管,用EP手套包裹凍存管(防止管內進水導致污染),迅速放于水浴鍋內,于1min內融化完全。
4. 取出凍存管,酒精噴灑消毒后擦干,置于超凈臺內。
5. 吸取凍存管內細胞懸液,加入步驟2中準備好的T25培養瓶內,8字緩慢搖勻。
6. 培養瓶放于37度C O 2恒溫培養箱內,靜置培養24h,更換新鮮換培養基(注意貼壁細胞、懸浮細胞不同換液操作方法)。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0. 1m g/m l),明膠(0. 1% ),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

小鼠脊髓微血管內皮細胞
注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和紀寧生物技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們紀寧系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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