一、基本信息

細胞名稱

HCT116-luc細胞＿人結(jié)腸癌細胞luc穩(wěn)轉(zhuǎn)株

細胞編號

JN-CC2344

細胞品牌

紀寧生物

細胞規(guī)格

1*10^6

細胞英文

HCT116-luc細胞

細胞凍存

液氮凍存

干冰運輸

2ml凍存管

活細胞運輸

T25瓶

培養(yǎng)基

凍存液基礎培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO

存接收后處理

干冰運輸，收到細胞后立即轉(zhuǎn)入-80℃冰箱短暫中轉(zhuǎn)或直接復蘇

收到細胞后，發(fā)現(xiàn)干冰已經(jīng)完全揮發(fā)、凍存管瓶蓋破裂脫落,請立即拍照與我們聯(lián)系

發(fā)貨方式

復蘇發(fā)貨（免運輸費用）/  凍存發(fā)貨（需加干冰運輸費用）

供應范圍

僅限于科研實驗使用，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用

復蘇接收后處理

收到細胞后，請首先檢查培養(yǎng)瓶是否破損或漏液，培養(yǎng)液是否混濁

如有漏液及培養(yǎng)液混濁情況請立即拍照把圖片發(fā)給我們

75%酒精消毒瓶身后放培養(yǎng)箱中靜置4-6h后，在顯微鏡下確認細胞狀態(tài)并拍照100倍和200倍的照片

若有貼壁細胞脫落，可收集上清離心，將沉淀用新的培養(yǎng)基接種至新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中

建議收到當天不要消化處理，如果細胞長滿90%，可選擇傳代處理

您收到細胞3天內(nèi)沒有反饋相關問題，出現(xiàn)的細胞問題將不提供免費重發(fā)服務

二、細胞培養(yǎng)操作及注意事項

細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①

棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次。

②

加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化。

③

1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止。

④

將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清。

⑤

用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基。

⑥

懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

細胞復蘇

①

將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②

在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。

細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①

棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）。

②

1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化。

③

將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞。

④

將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

三、售后服務

細胞予重發(fā)

1.細胞運輸中遭遇的各種問題，細胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等，重發(fā)。

2.收到細胞未開封，如出現(xiàn)污染狀況，重發(fā)。

3.收到細胞3天內(nèi)，發(fā)現(xiàn)污染問題，經(jīng)核實后，重發(fā)。

4.常溫發(fā)貨的細胞靜置2小時后，干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇2天后，絕大多數(shù)細胞未存活，經(jīng)核實后，重發(fā)。

5.常溫發(fā)貨的細胞靜置22小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇2天后，出現(xiàn)污染，經(jīng)核實后，重發(fā)。

6.細胞活性問題，請在收到產(chǎn)品3天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，經(jīng)核實后，重發(fā)。

細胞不重發(fā)

1.客戶操作造成細胞污染，不重發(fā)。

2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。

3.非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。

4.細胞狀態(tài)不好，未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細胞狀態(tài)照片，不重發(fā)。

5.細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的，不重發(fā)。

6.收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的，不重發(fā)。

四、特別說明

上海紀寧生物客戶購買本公司的細胞過程中，有任何技術問題或?qū)嶒瀱栴}，都可以撥打我們的免費服務電話15800441226 / 021-54721350，我們隨時給予技術中／實驗中的免費解答。