英文名稱 ： α-Ketoglutaric Acid (α-KG) Ccontent Assay kit
產品包裝 ： 盒裝
產品規格 ： 100T/96S
儲存條件 ： -20℃
檢測方法 ： 紫外分光光度法
有 效 期 ： 6個月
產品組成：
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試劑名稱
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規格
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保存條件
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提取液一
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液體60mL×1瓶
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2-8℃保存
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提取液二
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液體9mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑一
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液體40 mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑二
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液體4mL×1支
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2-8℃保存
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試劑三
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粉劑×1瓶
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-20℃保存
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試劑四
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粉劑×1瓶
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-20℃保存
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標準品
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粉劑×1支
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2-8℃保存
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產品說明：
α-酮戊二酸(α-Ketoglutarate，α-KG）是三羧酸循環中重要的代謝中間產物，是連接細胞內碳-氮代謝的關鍵節點。α-酮戊二酸作為一種短鏈羧酸分子， 是谷氨酰胺、谷氨酸等多種重要的氨基酸的前體， 不僅直接參與供能， 還參與細胞內多種化學反應，具有多種生理作用。
GDH催化NH4+ 、α-酮戊二酸和NADH，生成谷氨酸和NAD+ ，引起340nm吸光度下降。通過測定NADH的變 化，計算α-酮戊二酸含量。
注意：實驗之前建議選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計、低溫離心機、水浴鍋/金屬浴/恒溫培養箱、分析天平、可調式移液器、1mL 石英比色皿、研 缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、蒸餾水和冰。
注意事項：
1. 如果樣本 A1 測定＜A1 空白或?A 測定大于 0.8，可以用蒸餾水對樣本進行稀釋或者縮短第二步 37℃反應時間；如果?A 測定小于 0.01，可以加大樣本量或者延長第二步 37℃反應時間。最終計算時同步修改計算公式。
2. 提取液一中含有蛋白質沉淀劑， 因此上清液不能用于蛋白濃度測定。如需測定蛋白含量，需另取組織。
3. 溫度對該實驗影響較大， 務必保持反應溫度在 37℃。
實驗實例：
稱取 0.1066g 小鼠肝臟組織進行樣本處理，按照測定步驟操作，用 1mL 石英比色皿測得計算 ΔA 測定=A1 測定-A2 測定=1.201- 1.175=0.026 ，ΔA 標準=A1 標準-A2 標準=1.015-0.487=0.528 ，ΔA 空白=A1 空白-A2 空白=1.080- 1.074= 0.006 。
帶入公式計算：
α-KG含量（nmol/g 質量）=475×(ΔA測定-ΔA空白) ÷(ΔA標準-ΔA空白)÷W×F =170.72 nmol/g 質量
