英文名稱 :β-Amylase(β-AL)Activity Assay Kit(Iodine-starch colorimetry)
產(chǎn)品包裝 :盒裝
產(chǎn)品規(guī)格 :100T/48S
儲(chǔ)存條件 :2-8℃
檢測(cè)方法 :微量法
有 效 期 :6個(gè)月
產(chǎn)品組成:
試劑名稱
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規(guī)格
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保存條件
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試劑一
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粉劑×1瓶
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2-8℃保存
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試劑二
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液體15mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑三
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液體30mL×1瓶
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2-8℃保存
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標(biāo)準(zhǔn)品
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粉劑×1瓶
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2-8℃保存
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產(chǎn)品說明:
淀粉酶負(fù)責(zé)水解淀粉,主要包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。β-淀粉酶(EC3.2.1.2)從淀粉的非還原端切開α-1,4糖苷鍵,生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖。
碘可以與未被淀粉酶水解的淀粉結(jié)合,生成在570nm下有特征吸收峰的復(fù)合物,其深淺可計(jì)算出淀粉酶的活力單位。α-AL耐熱不耐酸,β-AL耐酸不耐熱。根據(jù)上述特性,鈍化其中之一,就可測(cè)得另一種活性。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、蒸餾水。
注意事項(xiàng):
吸光值大于1.5或者ΔA大于0.8時(shí),可以對(duì)樣本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后測(cè)定。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例:
1.取約0.1g藜葉片進(jìn)行樣本處理,取上清液后按照測(cè)定步驟操作,用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔAα=A5-(A1-A2)=1.065-
(0.849-0.220)=0.436,ΔA總=A5-(A3-A4)=1.065-(0.677-0.197)=0.585,帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y=2.628x-0.0051,計(jì)算x1=0.1678,x2=0.2245,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:
β-淀粉酶活性(U/g質(zhì)量)=0.2×x2÷W-0.2×x1÷W=0.2×0.2245÷0.1-0.2×0.1678÷0.1=0.1134U/g質(zhì)量。