英文名稱 ： Creatine Content Assay Kit
產(chǎn)品包裝 ： 盒裝
產(chǎn)品規(guī)格 ： 100T/48S
儲(chǔ)存條件 ： 2-8℃
檢測(cè)方法 ： 微量法
有 效 期 ： 6個(gè)月
產(chǎn)品內(nèi)容：
|
試劑名稱
|
規(guī)格
|
保存條件
|
|
提取液一
|
液體60mL×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
提取液二
|
液體10mL×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
試劑一
|
粉劑×1 支
|
2-8℃保存
|
|
試劑一稀釋液
|
液體5 mL×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
試劑二
|
液體2 mL×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
標(biāo)準(zhǔn)品
|
粉劑×1 支
|
2-8℃保存
|
產(chǎn)品說明：
肌酸(Creatine)是一種含氮化合物，自然存在于脊椎動(dòng)物體內(nèi)，能夠輔助為肌肉和神經(jīng)細(xì)胞提供能量。肌酸可由精氨酸(arginine)、甘氨酸(glycine)及甲硫氨酸(methionine)三種氨基酸合成，可由人體自行合成，也可以從食物中攝取。大約95%的肌酸存在于骨骼肌中，主要存在形式為磷酸肌酸。肌酸作為一種補(bǔ)充劑主要通過增加肌肉質(zhì)量，增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)表現(xiàn)能力。
肌酸也被作為神經(jīng)肌肉疾病的一種治療藥被廣泛研究，它可能有助于保護(hù)神經(jīng)和改善細(xì)胞生物功能狀態(tài)。
肌酸可在堿性條件下與聯(lián)乙酰-α-萘酚發(fā)生反應(yīng)，生成紅色產(chǎn)物在530nm處有吸收峰。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
注意事項(xiàng)：
1、顯色完成后，請(qǐng)?jiān)?0min之內(nèi)完成檢測(cè)。
2、提取液中含有蛋白沉淀劑，提取的上清液不能用于蛋白濃度的測(cè)定。若想要用蛋白濃度計(jì)算肌酸含量需要另取樣本，即取相同質(zhì)量的組織、同等數(shù)目的細(xì)菌或細(xì)胞，用1.1875mLPBS(生理鹽水）勻漿；取相同體積的血清(漿），用1.206mLPBS(生理鹽水)勻漿(相當(dāng)于提取步驟最終樣本上清液），用BCA法進(jìn)行蛋白濃度測(cè)定。
3、如果測(cè)定吸光值低于或超過標(biāo)準(zhǔn)溶液線性范圍的吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定。
4、試劑一、試劑二對(duì)人體有刺激性，請(qǐng)采取適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)措施。為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴乳膠手套操作。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：
1、取0.1g兔腎臟加入1mL提取液一進(jìn)行勻漿研磨離心，取0.8mL上清后加0.15mL提取液二，離心取上清后按照測(cè)定步驟操作，用96孔板測(cè)定后計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A對(duì)照=0.128-0.064=0.064，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.0062x-0.0143，計(jì)算x=12.629。按樣本質(zhì)量計(jì)算含量得：肌酸含量(μg/g質(zhì)量)=1.044×x÷W=131.85μg/g質(zhì)量。
2、取100μL牛血清加入1mL提取液一，離心取0.8mL上清后加0.15mL提取液二，離心取上清，之后按照測(cè)定步驟操作，用96孔板測(cè)定后計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A對(duì)照=0.271-0.07=0.201，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.0062x-0.0143，計(jì)算x=34.726。按照液體體積計(jì)算含量得：肌酸含量(μg/mL)=11.482×x=398.7μg/mL。
