大鼠骨外膜細胞
基本信息
產品名稱 ： 大鼠骨外膜細胞
產品品牌 ： 紀寧生物
組織來源 ： 骨組織
產品規格 ： 5×105cells/T25細胞培養瓶
細胞簡介
大鼠骨外膜細胞分離自骨外膜組織；骨外膜是指成骨細胞與破骨細胞緊貼骨密質外面包著的那層膜；在骨外膜和骨內膜中含有一種能夠生成骨的細胞，稱為成骨細胞，這種細胞具有使骨骼生長的功能。在骨外膜中還有另外一種專門破壞骨細胞的細胞，稱為破骨細胞。這兩種細胞作用相反又相互依據。成骨細胞像建筑工人，不停地生成新的骨組織，破骨細胞則像維修工人，不停地清除老化、死亡、破碎的骨結構，并且還負責拆除“違章建筑”，就是除去不需要的多余的骨組織，從而使骨的整體結構更符合生物力學的需要。
正常情況下，兩種細胞之間處于動態的平衡之中，完成骨的生長發育的新陳代謝。骨折之后，成骨細胞首先啟動，從而促使新骨痂的生成，即骨折的愈合。但是，股痂只是恢復了骨的連續性，往往不符合生物力學的需要，改建塑形的過程則必須有破骨細胞的參與才能完成。
方法簡介
紀寧生物實驗室分離的大鼠骨外膜細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶 。
質量檢測
紀寧生物實驗室分離的大鼠骨外膜細胞經Vim entin免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 ： 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ： 每2-3天換液一次
生長特性 ： 貼壁 細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 ： 可傳5代左右；3代以內狀態最佳
傳代比例 ： 1:2
消 化 液 ： 0.25% 胰蛋白酶
培養條件 ： 氣相：空氣，95% ；C O2，5%
大鼠骨外膜細胞體外培養周期有限；建議使用紀寧生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
大鼠骨外膜細胞是一種貼壁細胞，細胞形態呈成纖維細胞樣，在紀寧生物技術部標準操作流程下，細胞可傳5代左右；3代以內狀態最佳；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作
1.取出T 25細胞培養瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2.貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養基終止消化。
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4)待細胞完全貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1m g/m l），明膠（0.1% ），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
大鼠骨外膜細胞
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和紀寧生物技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們紀寧系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
