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大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

品牌:紀(jì)寧生物

貨號:JN25528

規(guī)格: 5×10?Cells

聯(lián)系方式:021-54721350

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產(chǎn)品詳情

大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
基本信息
產(chǎn)品名稱 : 大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品品牌 : 紀(jì)寧生物
組織來源 : 下腔靜脈組織
產(chǎn)品規(guī)格 : 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


細(xì)胞簡介  

大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自下腔靜脈組織;下腔靜脈是體內(nèi)最大的靜脈,收集下肢、盆部和腹部的靜脈血。下腔靜脈由左、右髂總靜脈匯合而成,匯合部位多在第5腰椎水平,少數(shù)平第4腰椎。下腔靜脈位于脊柱的右前方,沿腹主動脈的右側(cè)上行,經(jīng)肝的腔靜脈溝、穿膈的腔靜脈孔,開口于右心房。

下腔靜脈的前面有肝、胰頭、十二指腸水平部、右睪丸動脈及小腸系膜根越過。后面為有膈腳、第1~4腰椎、有腰交感干和腹主動脈的壁支。右側(cè)與腰大肌、右腎、右腎上腺相鄰,左側(cè)為腹主動脈。下腔靜脈的屬支有髂總靜脈、右睪丸靜脈、腎靜脈、右腎上腺靜脈、肝靜脈、膈下靜脈和腰靜脈,其中大部分屬支與同名動脈伴行。


方法簡介

紀(jì)寧生物實驗室分離的大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原紀(jì)寧合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶 。


質(zhì)量檢測

紀(jì)寧生物實驗室分離的大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)C D 31免疫熒光鑒定,純度可達90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

包被條件 : PLL(0.1m g/ml),明膠(0.1%)
培 養(yǎng) 基 : 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長特性 : 貼壁 
細(xì)胞形態(tài) : 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 : 可傳2-3代 
傳代比例 : 1:2
消 化 液 : 0.25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%
大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用紀(jì)寧生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細(xì)胞電子版照片


使用方法

大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)呈內(nèi)皮細(xì)胞樣,在紀(jì)寧生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞可傳2-3代;建議您收到細(xì)胞后盡快進行相關(guān)實驗。


客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞實驗
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0. 1m g/m l),明膠(0. 1% ),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。


大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和紀(jì)寧生物技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們紀(jì)寧系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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