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大鼠氣管軟骨細胞

品牌:紀寧生物

貨號:JN25612

規格: 5×10?Cells

聯系方式:021-54721350

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產品詳情

大鼠氣管軟骨細胞
基本信息
產品名稱 : 大鼠氣管軟骨細胞
產品品牌 : 紀寧生物
組織來源 : 氣管組織
產品規格 : 5×105cells/T25細胞培養瓶


細胞簡介  

大鼠氣管軟骨細胞分離自氣管組織;氣管(T rachea),呼吸器官的一部分;為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,與環狀軟骨相連;向下至第四、五胸椎體(相當胸骨角平面)交界處,分左、右主支氣管,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環狀軟骨構成,有彈性,軟骨為“C”字形的軟骨環,缺口向后,各軟骨環以韌帶連接起來,環后方缺口處由平滑肌和致密結締組織連接,保持了持續張開狀態。軟骨由軟骨細胞和細胞間質組成。軟骨內的基質呈凝膠狀態,具有較大韌性。軟骨是以支持作用為主的結締組織。軟骨內不含血管和淋巴管,營養物由軟骨膜內的血管中滲透到細胞間質中,再營養骨細胞。

根據細胞間質的不同可把軟骨分為3種,即透明軟骨、彈性軟骨和纖維軟骨。透明軟骨的基質是由膠原纖維、原纖維和周圍無定形的基質組成。在胚胎時期有臨時支架作用,后來這種作用被骨代替。成人的透明軟骨主要分布在氣管和支氣管壁中、肋骨的胸骨端和骨的表面(關節軟骨)。


方法簡介

紀寧生物實驗室分離的大鼠氣管軟骨細胞采用中性蛋白酶-膠原紀寧合消化法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。


質量檢測

紀寧生物實驗室分離的大鼠氣管軟骨細胞經Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養信息

培 養 基 : 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每3-4天換液一次
生長特性 : 貼壁
細胞形態 : 梭形、多角形
傳代特性 : 可傳5代左右;3代以內狀態最佳
傳代比例 : 1:2
消 化 液 : 0. 25% 胰蛋白酶
培養條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%
大鼠氣管軟骨細胞體外培養周期有限。建議使用紀寧生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。


細胞培養狀態

發貨時發送細胞電子版照片


使用方法

大鼠氣管軟骨細胞是一種貼壁細胞,細胞形態呈成纖維細胞樣,在紀寧生物技術部標準操作流程下,細胞可傳3代左右;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1.取出T 25細胞培養瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2.貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4)待細胞完全貼壁后,培養觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1m g/m l),明膠(0.1% ),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


大鼠氣管軟骨細胞

注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和紀寧生物技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們紀寧系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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