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小鼠陰道壁成纖維細胞

品牌:紀(jì)寧生物

貨號:JN25798

規(guī)格: 5×10?Cells

聯(lián)系方式:021-54721350

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產(chǎn)品詳情

小鼠陰道壁成纖維細胞
基本信息
產(chǎn)品名稱 :小鼠陰道壁成纖維細胞 
產(chǎn)品品牌 :紀(jì)寧生物
組織來源 :陰道組織
產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

細胞簡介  

小鼠陰道壁成纖維細胞分離自陰道組織。陰道位于膀胱、尿道和直腸之間,是一個富有彈性的管狀器官。它在人類生殖過程中具有多種生理功能,是連接子宮與外陰的通道,是排出月經(jīng)血、娩出嬰兒的必經(jīng)之路,也是一個重要的性交器官。陰道壁按組織學(xué)由外到內(nèi)分三層,即黏膜層、肌層和外膜。1) 黏膜層由上皮和固有膜組成。上皮較厚,為復(fù)層鱗狀上皮,從基底層到表層由基底層、旁基底層、中間層和表層組成。

沒有角化層。陰道粘膜的基底層呈細波紋狀起伏。2) 肌層由平滑肌組織構(gòu)成,肌束排列不規(guī)則,縱行和環(huán)形互相交錯。肌束間有較多的結(jié)締組織和彈性纖維。陰道外口有環(huán)形的橫紋肌稱括約肌。3) 外膜層為纖維膜,由結(jié)締組織構(gòu)成,內(nèi)含豐富的彈性纖維、靜脈叢、淋巴管和神經(jīng)。大鼠陰道壁成纖維細胞主要分離自外膜層,成纖維細胞(Fibroblast) 是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。

成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化。成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。

方法簡介

紀(jì)寧生物實驗室分離的小鼠陰道壁成纖維細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。

質(zhì)量檢測

紀(jì)寧生物實驗室分離的小鼠陰道壁成纖維細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息

培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態(tài) :成纖維細胞樣
傳代特性 :可傳2-3代左右。2代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 :氣相:空氣,95% 。C O2,5%
小鼠陰道壁成纖維細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用紀(jì)寧生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片


使用方法

小鼠陰道壁成纖維細胞是一種貼壁細胞,細胞形態(tài)呈成纖維細胞樣,在紀(jì)寧生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細胞可傳2-3代左右。2代以內(nèi)狀態(tài)最佳。建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗。

客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T 25細胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0. 1m g/m l),明膠(0. 1% ),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

小鼠陰道壁成纖維細胞
注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和紀(jì)寧生物技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們紀(jì)寧系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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