英文名稱 ： Protein Free Thiol Content Assay Kit
產品包裝 ： 盒裝
產品規格 ： 50T/24S
儲存條件 ： 2-8℃
檢測方法 ： 可見分光光度法
有 效 期 ： 6個月
產品組成：
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試劑名稱
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規格
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保存條件
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提取液一
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液體 25 mL×1 瓶
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2-8℃保存
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提取液二
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液體 25mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑一
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液體60mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑二
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液體20mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑三
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液體17mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑四
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液體2mL×1支
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2-8℃保存
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標準品
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粉劑×1 支
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2-8℃保存
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產品說明：
巰基的存在使得蛋白質能夠進行二硫鍵的形成， 從而維持分子的穩定性和功能性。此外， 巰基還參與到氧化 還原反應中， 具有重要的生物學作用。 在細胞內，巰基含量的變化與多種疾病的發生和進展密切相關，因此巰基 也成為了生物醫學領域中的重要研究對象。本試劑盒測定的是蛋白質中的游離巰基含量。一定條件下巰基會發生親核反應，即巰基與5,5’-二硫代-雙-硝基苯甲酸（DTNB）反應，生成黃色化合物，在 412nm處有吸收峰，據此可以計算蛋白質游離巰基含量。
注意：實驗之前建議選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者 增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、低溫離心機、 研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、丙酮（AR）、蒸餾水。
注意事項：
1. 若樣本ΔA測定<0.01,可適當增大樣本量后測定，注意同步修改空白管和標準管及計算公式；若樣本ΔA測
定>1.5,可用試劑一稀釋沉淀溶解液后測定，注意同步修改計算公式中的稀釋倍數。
2.可使用BCA法測定蛋白濃度。
實驗實例：
1、取100μL馬血清，按照測定步驟操作，用1mL玻璃比色皿測得ΔA測定=A測定-A對照=0.110-0.021=0.089，
ΔA 標準=A 標準-A 空白=0.633-0.076=0.557，按樣本液體體積計算蛋白質游離巰基含量得： 蛋白質游離巰基含量(μmol/mL）=2.5×ΔA 測定÷ΔA 標準×F =0.399μmol/mL。
2、取0.1036g鼠肝，按照測定步驟操作，用1mL玻璃比色皿測得ΔA測定=A測定-A對照=0.339-0.095=0.244，ΔA標準=A標準-A 空白=0.633-0.076=0.557 ,按樣本質量計算蛋白質游離巰基含量得：
蛋白質游離巰基含量(μmol/g質量）=0.25×ΔA 測定÷ΔA 標準÷W×F =1.057μmol/g 質量。
3、取 0.1078g 黃豆粉，沉淀溶解液用試劑一稀釋2倍后， 按照測定步驟操作， 用1mL 玻璃比色皿測得 ΔA測定 =A測定-A對照=0.108-0.033=0.075，ΔA標準=A 標準-A空白=0.633-0.076=0.557，按樣本質量計算蛋白質游離 巰基含量得：
蛋白質游離巰基含量(μmol/g質量）=0.25×ΔA 測定÷ΔA 標準÷W×F =0.625μmol/g 質量。
