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紀寧生物人舌表皮細胞專用培養基培養操作

紀寧生物人舌表皮細胞專用培養基培養操作

一、細胞培養操作
收貨處理
取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態
傳代密度
細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養
傳代比例
首次傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
1. 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養基終止消化;
3. 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;
4. 待細胞完全貼壁后,培養觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的完全培養基。
二、注意事項
重要提醒
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。
到貨須知
1. 收到細胞后,首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,干冰運輸的細胞檢查干冰是否完全揮發,細胞是否解凍,若有上述現象發生請及時和我們聯系。
2. 靜置完成后,取出細胞培養瓶,鏡檢、拍照(當天以及第 2,3 天請拍照),記錄細胞狀態 (所拍照片將作為后續服務依據);建議細胞傳代培養后,定期拍照、記錄細胞生長狀態。
3. 由于運輸的原因,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F象。個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
4. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養條件一致,若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由客戶自行承擔。
三、售后服務
細胞予重發
1. 細胞運輸中遭遇的各種問題,細胞丟失瓶身破損、培養液嚴重漏液等,重發。
2. 收到細胞未開封,如出現污染狀況,重發。
3. 收到細胞3天內,發現污染問題,經核實后,重發。
4. 常溫發貨的細胞靜置2小時后,干冰凍存發貨的細胞復蘇2天后,絕大多數細胞未存活,經核實后,重發。
5. 常溫發貨的細胞靜置22小時并且未開封或干冰凍存發貨的細胞復蘇2天后,出現污染,經核實后,重發。
6. 細胞活性問題,請在收到產品3天內給我們提出真實的實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經核實后,重發。
細胞不重發
1. 客戶操作造成細胞污染,不重發。
2. 客戶嚴重操作失誤致細胞狀態不好,不重發。
3. 非我們推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發。
4. 細胞狀態不好,未提供真實清晰的培養前3天的細胞狀態照片,不重發。
5. 細胞培養時經其它處理導致細胞出現問題的,不重發。
6. 收到細胞發現問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發。
四、特別說明
上海紀寧生物客戶購買本公司的細胞過程中,有任何技術問題或實驗問題,都可以撥打我們的免費服務電話15800441226 / 021-54721350,我們隨時給予技術中/實驗中的免費解答。
上海紀寧生物以誠信為本,努力打造的品牌,為您提供的人舌表皮細胞專用培養基售中、售前、售后服務,具有的技術團隊,把產品引入國內市場,滿足國內廣大客戶的需求,在二十一世紀生命科學蓬勃發展的時代,將緊跟生命科學的發展動態,為廣大科研學者探索生命的奧秘而奉獻綿薄之力!
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