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紀寧生物人舌表皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)操作

紀寧生物人舌表皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)操作

一、細胞培養(yǎng)操作
收貨處理
取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)
傳代密度
細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)
傳代比例
首次傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
1. 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化;
3. 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4. 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的完全培養(yǎng)基。
二、注意事項
重要提醒
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。
到貨須知
1. 收到細胞后,首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否完全揮發(fā),細胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照(當天以及第 2,3 天請拍照),記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
3. 由于運輸?shù)脑颍糠旨毎捎跍囟茸兓皠×遗鲎菜劳銎扑樾纬伤槠钦,F(xiàn)象。個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
4. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由客戶自行承擔。
三、售后服務
細胞予重發(fā)
1. 細胞運輸中遭遇的各種問題,細胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā)。
2. 收到細胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā)。
3. 收到細胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實后,重發(fā)。
4. 常溫發(fā)貨的細胞靜置2小時后,干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇2天后,絕大多數(shù)細胞未存活,經(jīng)核實后,重發(fā)。
5. 常溫發(fā)貨的細胞靜置22小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇2天后,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實后,重發(fā)。
6. 細胞活性問題,請在收到產(chǎn)品3天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經(jīng)核實后,重發(fā)。
細胞不重發(fā)
1. 客戶操作造成細胞污染,不重發(fā)。
2. 客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā)。
3. 非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā)。
4. 細胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細胞狀態(tài)照片,不重發(fā)。
5. 細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā)。
6. 收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā)。
四、特別說明
上海紀寧生物客戶購買本公司的細胞過程中,有任何技術(shù)問題或?qū)嶒瀱栴},都可以撥打我們的免費服務電話15800441226 / 021-54721350,我們隨時給予技術(shù)中/實驗中的免費解答。
上海紀寧生物以誠信為本,努力打造的品牌,為您提供的人舌表皮細胞專用培養(yǎng)基售中、售前、售后服務,具有的技術(shù)團隊,把產(chǎn)品引入國內(nèi)市場,滿足國內(nèi)廣大客戶的需求,在二十一世紀生命科學蓬勃發(fā)展的時代,將緊跟生命科學的發(fā)展動態(tài),為廣大科研學者探索生命的奧秘而奉獻綿薄之力!
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