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紀(jì)寧生物U87MG-luc細(xì)胞人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞luc穩(wěn)轉(zhuǎn)株的存接收后處理

紀(jì)寧生物U87MG-luc細(xì)胞人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞luc穩(wěn)轉(zhuǎn)株的保存及接收后處理方法

存接收后處理
干冰運(yùn)輸,收到細(xì)胞后立即轉(zhuǎn)入-80℃冰箱短暫中轉(zhuǎn)或直接復(fù)蘇
收到細(xì)胞后,發(fā)現(xiàn)干冰已經(jīng)完全揮發(fā)、凍存管瓶蓋破裂脫落,請立即拍照與我們聯(lián)系
發(fā)貨方式
復(fù)蘇發(fā)貨(免運(yùn)輸費(fèi)用)/  凍存發(fā)貨(需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用)
供應(yīng)范圍
僅限于科研實(shí)驗(yàn)使用,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
復(fù)蘇接收后處理
收到細(xì)胞后,請首先檢查培養(yǎng)瓶是否破損或漏液,培養(yǎng)液是否混濁,如有漏液及培養(yǎng)液混濁情況請立即拍照把圖片發(fā)給我們,75%酒精消毒瓶身后放培養(yǎng)箱中靜置4-6h后,在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)并拍照100倍和200倍的照片若有貼壁細(xì)胞脫落,可收集上清離心,將沉淀用新的培養(yǎng)基接種至新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,建議收到當(dāng)天不要消化處理,如果細(xì)胞長滿90%,可選擇傳代處理,您收到細(xì)胞3天內(nèi)沒有反饋相關(guān)問題,出現(xiàn)的細(xì)胞問題將不提供免費(fèi)重發(fā)服務(wù)。
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作及注意事項(xiàng)
細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次。
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化。
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止。
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清。
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基。
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
細(xì)胞復(fù)蘇
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)。
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化。
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞。
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
三、售后服務(wù)
細(xì)胞予重發(fā)
1.細(xì)胞運(yùn)輸中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā)。
2.收到細(xì)胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā)。
3.收到細(xì)胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā)。
4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置2小時(shí)后,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā)。
5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置22小時(shí)并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā)。
6.細(xì)胞活性問題,請?jiān)谑盏疆a(chǎn)品3天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā)。
細(xì)胞不重發(fā)
1.客戶操作造成細(xì)胞污染,不重發(fā)。
2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā)。
3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā)。
4.細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供真實(shí)清晰的培養(yǎng)前3天的細(xì)胞狀態(tài)照片,不重發(fā)。
5.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā)。
6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時(shí)間證明大于3天的,不重發(fā)。
上海紀(jì)寧生物以誠信為本,努力打造品牌,為您提供U87MG-luc細(xì)胞人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞luc穩(wěn)轉(zhuǎn)株的售中、售前、售后服務(wù),具有的技術(shù)團(tuán)隊(duì),把產(chǎn)品引入國內(nèi)市場,滿足國內(nèi)廣大客戶的需求,在二十一世紀(jì)生命科學(xué)蓬勃發(fā)展的時(shí)代,將緊跟生命科學(xué)的發(fā)展動態(tài),為廣大科研學(xué)者探索生命的奧秘而奉獻(xiàn)綿薄之力!
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